[发明专利]从杜仲原料中提取分离绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷和杜仲胶的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从杜仲(Eucommia ulmodies Oliv.)中同时分离提纯出绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷和杜仲胶的方法；属于天然药物提取领域。

背景技术

杜仲为杜仲科杜仲属植物，我国特有的多年生落叶乔木，分布于陕西、甘肃、河南、湖北、四川、云南、贵州、湖南及浙江等省区，现各地广泛栽种。在自然状态下，生长于海拔300-500米的低山，谷地或低坡的疏林里，对土壤的选择并不严格，在瘠薄的红土，或岩石峭壁均能生长。树皮药用，作为强壮剂及降血压，并能医腰膝痛，风湿及习惯性流产等。杜仲中化学成分十分复杂，皮和叶中的绿原酸具有抗菌、消炎、解毒、利胆、降压和升高白细胞及显著增加胃肠蠕动和促进胃液分泌等，对大肠杆菌、金色葡萄球菌、肺炎球菌和病毒有较强的抑制作用；对急性咽喉炎症和皮肤病有明显疗效，临床上用于治疗急性细菌性感染疾病及放化疗时所致的白细胞减少症，对月经过多，子宫功能性出血有良好的止血效果绿原酸的主要药理作用有：桃叶珊瑚苷是一种重要的生物活性物质，具有清湿热、利小便、镇痛、降压、保肝护肝、抗肿瘤等作用。它能促进干细胞再生，明显抑制乙型肝炎病毒DNA的复制，其苷元及有效多聚体是一种抗菌素。松脂醇二葡萄糖苷是杜仲降压的主要成分，作用于血管平滑肌，使外周血管扩张。杜仲胶是硬橡胶，供工业原料及绝缘材料，抗酸、碱及化学试剂的腐蚀的性能高，可制造耐酸、碱容量及管道的衬里及牙科材料等。

杜仲的成分复杂，活性成分分离困难，目前仅有少数企业对杜仲的某个单一的成分进行分离，且工艺复杂，操作繁琐，收率低，成本高，其他成分作为废弃物处理，并没有得到很好的利用，造成资源的严重浪费，虽有专利CN200810031122.1对杜仲环烯醚萜类的分离报道，但多类成分(咖啡奎宁酸类、环烯醚萜类、木质素类、异戊二烯高分子)综合分离的大规模生产的未见报道，对于从杜仲各种不同原料中同时对多类成分提取、分离、纯化的生产方法，也未见报道。

发明内容

针对现有技术对杜仲中的药物活性成分的分离存在不能同时获得多类药物成分，造成有效成分浪费，且工艺复杂，操作繁琐，得到的药物有效成分收率低，成本高等一系列的缺陷，本发明的目是在于提供一种从杜仲中同时较高收率提取分离高纯度绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷和杜仲胶的方法，该方法操作简单，成本低，实现了自然资源的综合利用，满足工业化生产。

本发明提供了一种从杜仲原料中提取分离绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷和杜仲胶的方法，该方法包括以下步骤：

步骤一：提取

将杜仲原料干燥、粉碎后，采用有机溶剂提取，过滤，所得提取液浓缩至膏状物，所得膏状物用75～85℃热水溶解，冷却到0～30℃后，静置0.5～24h，离心分离；

步骤二：富集

步骤一离心分离得到的离心液采用大孔吸附树脂、氧化铝或葡聚糖凝胶进行吸附富集，吸附完成后，依次采用质量百分比浓度为35～45％和65～75％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，洗脱液经浓缩、干燥，得到粉状混合物；

步骤三：分离

将步骤二所得粉状混合物与硅胶、氧化铝、十八碳烷基键合硅胶、MCI-GELCHP20/P120或葡聚糖凝胶混合装柱，以氯仿-甲醇-水系统进行梯度洗脱，采用TLC薄层色谱跟踪检测，分别分离出含绿原酸、桃叶珊瑚苷和松脂醇二葡萄糖苷馏分；将各馏分分别浓缩、干燥和结晶，得到绿原酸、桃叶珊瑚苷和松脂醇二葡萄糖苷晶体；

步骤四：提取杜仲胶

步骤一中过滤所得提取渣通过水解后，过滤，滤渣采用低极性有机溶剂回流提取，提取液经冷却结晶，得到杜仲胶。

本发明的从杜仲原料中提取分离绿原酸、松脂醇二葡萄糖苷、桃叶珊瑚苷和杜仲胶的方法还包括以下优选方案：

优选的方案中杜仲原料为杜仲皮、叶或籽粕中的一种或几种。其中，杜仲皮可以为新鲜杆或枝皮，杜仲叶可以为新鲜叶。

优选的方案中步骤一中所述的提取为冷浸静态提取、冷浸动态提取、热回流提取、热浸静态提取、热浸动态提取或逆流连续提取方式中的任意一种。最优选为热回流提取。

优选的方案中步骤一中的有机溶剂为甲酸、乙酸、甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、乙二醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、正己烷、环己烷、石油醚中的一种或几种；最优选的有机溶剂为甲醇或乙醇。