[发明专利]一种金花茶油类挥发成分检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及固相萃取-气相色谱-质谱联用技术领域，特别涉及一种应用在金花茶油类挥发成分的检测方法。

背景技术

金花茶属于山茶科、山茶属，与茶、山茶、南山茶、油茶、茶梅等为孪生姐妹。金花茶的花金黄色，耀眼夺目，仿佛涂着一层蜡，晶莹而油润，似有半透明之感。金花茶单生于叶腋，花开时，有杯状的、壶状的或碗状的，娇艳多姿，秀丽雅致。以前，人们没有见到过花色金黄的种类。1960年，中国科学工作者首次在广西南宁一带发现了一种金黄色的山茶花，被命名为金花茶。国外称之为神奇的东方魔茶，被誉为“植物界大熊猫”、“茶族皇后”，是国家八种一级保护植物之一，广东梅州、广西防城港等地也有人工引种。

关于金花茶，《本草纲目》有载：“山茶产南方……又有一捻红，千叶红、千叶白等名，或云亦有黄色者”；广西《地方志》亦有记载：“金花茶，常绿灌木，生长在荒山野岭中”；“金花茶的叶和花，经加工可作名贵清热、治痢疾、去脂降压”。在两广地区民间，千百年来百姓广泛应用金花茶泡茶或煲汤以清热解毒，降脂降糖、利尿去湿、降压及提高免疫力等。

研究发现，金花茶叶和花中富含茶多酚，β-谷甾醇，花青素、总黄酮(异黄酮、双黄酮、黄烷醇、查尔酮、橙酮、花色苷、双氢黄（醇）及新黄酮类等)、多种氨基酸、齐墩果酸、可溶性糖、天然维生素E、十八碳酸、邻苯二甲酸单（乙基己基）酯、山奈酚等天然活性成分及硒、锰、铁、锌等微量元素。

在金花茶的成分中，油性挥发性成分主要包括十八醛、 1，2-环氧十八烷、 1，2-环氧十九烷、 紫罗兰酮、叶绿醇、亚油酸、亚油酸甲酯、亚油酸乙酯等，该类油性挥发成分具有祛斑、淡化疤痕及妊娠纹等功效，具有非常广泛的应用前景。

由于油性挥发成分在金花茶中含量较低，现有的研究大多集中在一些含量丰度较高金花茶活性成分如金花茶多糖、茶多酚、总黄酮等分离检测方面，针对于金花茶活性成分中的油性挥发成分没有过多的涉及。。

固相微萃取技术作为一种新型的样品预处理技术于1990年由Pawliszyn提出，由于其节省溶剂且操作简单快速，因此应用广泛。搅拌棒吸附萃取是一种新型的固相微萃取样品前处理技术,具有固定相体积大、萃取容量高、无需外加搅拌子、可避免竞争性吸附、能在自身搅拌的同时实现萃取富集等优点,广泛应用于食品、医药、环境和生物样品分析的前处理。目前，固相微萃取技术一般直接搅拌棒吸附萃取：一般适用于无挥发性或挥发性较弱物质的萃取，如金花茶中挥发性较弱的茶多酚、总黄酮、皂苷类物质等，若直接应用于油性挥发成分检测，油性成分会直接挥发，并据此严重影响检测的准确程度。

搅拌棒吸附萃取是一种非常适合低浓度样品富集的技术，只需要将外壁包裹着吸附材料的磁力吸附搅拌棒放入装有样品溶液的杯或瓶中，开动磁力搅拌器搅拌几分钟到十多分钟，富集后的活性有效成分就会被富集吸附在搅拌棒上。通过萃取搅拌棒的富集，可以具有分析多种浓度低于ppb的化合物的能力。

搅拌棒吸附萃取不需要大量的溶剂萃取，富集效率比固相微萃取高，因为动态搅拌富集，重复性也比固相萃取好，使用简单方便，适合金花茶活性成分分析，特别是半挥发或不挥发的茶多酚、总黄酮类成分，一般的吹脱捕集技术或顶空分析技术很难分析，但是，应用固相萃取技术分析上述组分具有较好的效果。该技术常与高效液相色谱、液相色谱-质谱、气相色谱-质谱、毛细管电泳等联用实现对有效成分的同步检测。

但是，搅拌棒固相萃取技术尽管优势明显，但是其性能很大程度取决于其涂层材料的性能。传统的搅拌棒固相微萃取所用的萃取纤维搅拌棒表面涂有的薄层吸附高分子材料多为全氟化树脂、聚吡咯、甲基乙烯基硅氧烷、环氧-聚二甲基硅氧烷等，这些材料往往价格较高且质地脆弱，在实际加工中需要通过加厚涂层保证吸附性能，涂层的加厚会造成既会降低检测灵敏度，又会提高搅拌棒涂层在实际操作过程中发生断裂的概率，在分析某些物质例如植物活性成分时还会出现样品在固相萃取涂层材料的遗留现象或基质干扰现象，严重影响检测的准确性。

发明内容

本发明针对现有技术存在的问题，结合金花茶油性挥发成分检测的现状，针对搅拌棒固相萃取检测技术存在的问题，形成了一种金花茶油类挥发成分检测方法，具有检测准确、灵敏度高、选择性吸附效果好和使用寿命长的特点。

本发明的内容为：

一种金花茶油类挥发成分检测方法，包括固相萃取吸附-气相色谱-质谱联用检测，所述固相萃取为顶空搅拌棒固相吸附萃取，所述搅拌棒涂有基于二维或三维的石墨烯-聚合物涂层。