[发明专利]一种检测人体血清中抗组蛋白抗体的方法无效
| 申请号: | 201410684960.4 | 申请日: | 2014-11-25 |
| 公开(公告)号: | CN104459150A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
| 发明(设计)人: | 张志新;叶正义;陶家春;杨秦 | 申请(专利权)人: | 成都威尔诺生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
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| 地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 人体 血清 组蛋白 抗体 方法 | ||
技术领域
本发明涉及抗组蛋白抗体领域,具体地,涉及一种检测人体血清中抗组蛋白抗体的方法。
背景技术
抗组蛋白抗体:组蛋白是染色质基本结构核小体的重要组成部分。抗组蛋白抗体可在多种自身免疫疾病中出现,不具诊断特异性。因此,检测人体血清中抗组蛋白抗体至关重要,现有的人体血清中抗组蛋白抗体的检测都是采用试剂盒进行检测,以试剂盒的方式进行人体血清中抗组蛋白的检测方便有效,试剂盒具体是指在同一个 盒子里盛放有用于检测人体血清蛋白中抗组蛋白抗体的所有试剂和对照液,包括载体、抗原或抗体、酶底物、阴性对照品和阳性对照品、结合物以及标本的稀释液、洗涤液、酶反应终止液。试剂盒的生产正是为了使实验人员能够摆脱繁重的试剂配置优化过程,所以试剂盒中一般配备与相应的使用说明书,用户按照说明书不需要或只需少量的优化即可得到满意的结果。目前,在检测人血清中抗组蛋白抗体的检测试剂盒中,阳性对照抗体多数都来自病人的阳性对照血清。这样,每个批次的试剂盒,阳性对照或许不同,导致每个批次中阳性对照抗体不稳定的问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种检测人体血清中抗组蛋白抗体的方法,以克服现有试剂盒在检测人血清中抗组蛋白抗体的含量时,因每个批次的阳性对照抗体不稳定导致结果不稳定的问题。
本发明解决上述问题所采用的技术方案是:一种检测人体血清中抗组蛋白抗体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
首先,制备试剂盒:所述试剂盒包括用于表达抗组蛋白抗体的载体、阴性对照液、阳性对照液、酶底物、稀释液、终止液;
其次,用稀释液对阳性对照液按照实验所设定的值进行稀释处理,对稀释后的阳性对照液进行数据选择;
然后,稀释后的阳性对照液、用于实验的人体血清中抗组蛋白抗体的载体表达;
最后,结合实验数据对人体血清中抗组蛋白抗体的含量进行分析。
试剂盒的检测方式使得检测的操作简单方便,现有的试剂盒中的阳性对照液一般是来自病人的血清,没有经过筛选直接进行载体表达,容易导致不同批次的血清中抗组蛋白抗体的含量的不稳定,进而导致检测人体血清中抗组蛋白抗体的的实验结果不稳定,使得实验数据不可信;本发明通过在阳性对照液进行载体表达之前,先对阳性对照液进行筛选,即从来自病人的血清中选择抗组蛋白抗体含量相对集中区域数值范围内的阳性对照液作为用于试剂盒的阳性对照液,经选择后的阳性对照液在进行人体血清中抗组蛋白抗体的检测的实验数据比较稳定,克服现有试剂盒在检测人血清中抗组蛋白抗体的含量时,因每个批次的阳性对照抗体不稳定导致结果不稳定的问题。
进一步地,阳性对照物来自病人的阳性对照血清的抗组蛋白抗体。
进一步地,阳性对照液在进行载体表达之前进行纯化处理。经纯化后的阳性对照液具有更好的表达性能,进一步地提高了载体表达的稳定性。
进一步地,载体为哺乳动物细胞。哺乳动物细胞与人体细胞环境具有较高的相似度,且哺乳动物细胞比价容易获得,能够降低实验成本。
综上,本发明的有益效果是:
1、本发明通过在阳性对照液进行载体表达之前,先对阳性对照液进行筛选,即从来自病人的血清中选择抗组蛋白抗体含量相对集中区域数值范围内的阳性对照液作为用于试剂盒的阳性对照液,经选择后的阳性对照液在进行人体血清中抗组蛋白抗体的检测的实验数据比较稳定,克服现有试剂盒在检测人血清中抗组蛋白抗体的含量时,因每个批次的阳性对照抗体不稳定导致结果不稳定的问题。
2、本发明通过将载体设置为哺乳动物细胞。哺乳动物细胞与人体细胞环境具有较高的相似度,且哺乳动物细胞比价容易获得,能够降低实验成本。
具体实施方式
下面结合实施例,对发明作进一步地的详细说明,但本发明的实施方式不限于此。
实施例:
一种检测人体血清中抗组蛋白抗体的方法,包括以下步骤:
首先,制备试剂盒:所述试剂盒包括用于表达抗组蛋白抗体的载体、阴性对照液、阳性对照液、酶底物、稀释液、终止液;
其次,用稀释液对阳性对照液按照实验所设定的值进行稀释处理,对稀释后的阳性对照液进行数据选择;
然后,稀释后的阳性对照液、用于实验的人体血清中抗组蛋白抗体的载体表达;
最后,结合实验数据对人体血清中抗组蛋白抗体的含量进行分析。
所述阳性对照物来自病人的阳性对照血清的抗组蛋白抗体,所述阳性对照液在进行载体表达之前进行纯化处理,所述载体为哺乳动物细胞。
如上所述,可较好的实现本发明。
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