[发明专利]环介导等温扩增法检测B群链球菌的引物组及试剂盒

权利要求书

1.一种环介导等温扩增法检测B群链球菌的引物组，其特征在于，包括，特异性外引物F3：其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；特异性外引物B3：其核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；特异性内引物FIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；特异性内引物BIP：其核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示。

2.一种环介导等温扩增法检测B群链球菌的试剂盒，其特征在于，包括装有18μL反应液的反应管，装有10μL GBS DNA的阳性对照管，装有100μL无菌超纯水的阴性对照管，所述反应液内含反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、显色液、外引物F3、外引物B3、内引物FIP、内引物BIP；所述反应缓冲液各组分的浓度如下：400mM的Tris-Hcl，pH8.8；20mM的氯化钾；20mM的硫酸铵；16mM的硫酸镁和0.2％Tween₂₀、1.6M的甜菜碱、2.8mM×4种dNTP；Bst DNA聚合酶的活性含量为：160单位/18μL；显色液为：锰离子鳌和型钙黄绿素，0.001μmol/18μL；引物F3：4pmol/18μL，引物B3：4pmol/18μL；引物FIP：32pmol/18μL，引物BIP：32pmol/18μL。

3.如权利要求2所述试剂盒，其特征在于，装有18μL反应液的反应管为8个，装有10μL GBS DNA的阳性对照管1个，装有100μL无菌超纯水的阴性对照管1个。

4.如权利要求2或3所述试剂盒，其特征在于，所述试剂盒内还含20个适配1-10μl移液器的Tip头。

5.如权利要求2-4任一所述试剂盒的使用方法，其特征在于，将2μL待检DNA加入反应管内，混匀，同时设阴性对照和阳性对照，将反应管置水浴锅中进行扩增，扩增条件为：60-65℃水浴恒温反应30-40min，观察颜色变化。