[发明专利]板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺在审
| 申请号: | 201410673779.3 | 申请日: | 2014-11-24 |
| 公开(公告)号: | CN105616464A | 公开(公告)日: | 2016-06-01 |
| 发明(设计)人: | 雷印平 | 申请(专利权)人: | 雷印平 |
| 主分类号: | A61K36/195 | 分类号: | A61K36/195;A61K36/315;A61K125/00 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 271600 山东省泰安市*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 板蓝根 提取物 核苷 成分 纯化 工艺 | ||
技术领域
本发明涉及板蓝根中核苷类成分的纯化领域,具体为一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺。
背景技术
板蓝根为我国使用历史悠久的传统中药,又名靛青根、蓝靛根、靛根,为清热解毒之常用中药,始载于《神农本草经》,味苦,性寒,有清热解毒,凉血利咽功能。用于温毒发斑、舌绛紫暗、痄腮、烂喉丹痧、大头瘟疫、丹毒、痈肿等症。目前所用的板蓝根分为2种:一种为十字花科植物菘蓝IsatisindigoticaFort.的根,全国多数地区,特别北方地区广泛使用,习称“北板蓝”。另一种为爵床科植物马蓝Strobilanthescusia(Nees)O.Ktze.的根,华南地区及西南大部分地区习惯应用,习称“南板蓝”。两者在中医临床上均有应用,中国药典2005版一部规定十字花植物菘蓝IsatisindigoticaFort.的干燥根是板蓝根的主要来源。
板蓝根制剂在临床上常用于病毒性疾病及细菌感染疾病的防治,尤其在抗病毒方面疗效确切。众多文献报道板蓝根对于病毒引起的流感、乙型肝炎、单纯疱疹、病毒性心肌炎、肾病综合征、出血热、腮腺炎等多种疾病均有较好的治疗或预防作用,是公认的有较好抗病毒效果的少数中药之一。板蓝根中主要含有吲哚类、有机酸类、氨基酸类、核苷类等成分,核苷类成分为板蓝根抗病毒作用的有效部位之一。有关核苷类成分的提取纯化报道较少,本实验以核苷为对照品测定总核苷的含量,通过研究考察多种类型的大孔吸附树脂对板蓝根总核苷的吸附性能、洗脱参数等因素,对采用HPD450型大孔树脂纯化板蓝根总核苷类成分的工艺进行了研究。
发明内容
本发明针对以上不足之处,提供了一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺,工艺简单,产率高,易实行。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺,(1)板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500g,加水煎煮2次,第1次加10倍量的水(m/v),加热至沸腾后,保持沸腾2h,滤过;第2次加8倍量的水,加热至沸腾后,保持沸腾1h,滤过,合并2次煎煮液,滤过,滤液浓缩至约750mL,冷却,加乙醇使含醇量达到70%,搅匀,冷藏24h,滤过,回收乙醇至500mL,滤过,冷藏,得到含1g·mL-1原药材的板蓝根水提醇沉溶液。
(2)板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法,将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并,得到HPD450大孔树脂的上样溶液,洗脱溶剂选用50%乙醇,洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍,上样溶液的pH为2,树脂柱的径高比为1∶7,上样流速选择1.5BV·h-1。
本发明的有益效果是:采用大孔树脂分离纯化工艺中,除树脂种类外,洗脱溶剂、样品溶液的pH值、柱径高比、上样速度等均对纯化效果产生影响,本发明对上述因素均进行了实验考察,并根据考察结果确定了采用HPD450型大孔树脂纯化板蓝根溶液中核苷类成分的工艺,经对纯化工艺进行验证和精制度测定,表明采用确定的纯化工艺可获得纯度大于50%的纯化产物,并具有良好的精制度,达到了实验预期的目的。
具体实施方式
实施例1一种板蓝根提取物中核苷类成分的纯化工艺,包含有如下步骤:
(1)板蓝根提取液的制备称取板蓝根药材500g,加水煎煮2次,第1次加10倍量的水(m/v),加热至沸腾后,保持沸腾2h,滤过;第2次加8倍量的水,加热至沸腾后,保持沸腾1h,滤过,合并2次煎煮液,滤过,滤液浓缩至约750mL,冷却,加乙醇使含醇量达到70%,搅匀,冷藏24h,滤过,回收乙醇至500mL,滤过,冷藏,得到含1g·mL-1原药材的板蓝根水提醇沉溶液。
(2)板蓝根液核苷类成分的纯化采用大孔树脂纯化法,将上一步得到的板蓝根提取液通过与生药材等量的732阳离子树脂柱的滤出液以及去离子水洗脱溶液合并,得到HPD450大孔树脂的上样溶液,洗脱溶剂选用50%乙醇,洗脱溶剂的体积为柱体积的5倍,上样溶液的pH为2,树脂柱的径高比为1∶7,上样流速选择1.5BV·h-1。
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