[发明专利]检测北京鸭免疫相关基因转录水平的试剂盒及其应用

权利要求书

1.Real-Time PCR检测北京鸭免疫相关基因转录水平的试剂盒，其特征在于所述的试剂盒包括如下引物：

GAPDH 5’-ATGTTCGTGATGGGTGTGAA-3’

5’-CTGTCTTCGTGTGTGGCTGT-3’

IFN-β5’-CCTCAACCAGATCCAGCATT-3’

5’-GGATGAGGCTGTGAGAGGAG-3’

IL-1β5’-TCGACATCAACCAGAAGTGC-3’

5’-GAGCTTGTAGCCCTTGATGC-3’

IL-25’-GCCAAGAGCTGACCAACTTC-3’

5’-ATCGCCCACACTAAGAGCAT-3’

IL-65’-TTCGACGAGGAGAAATGCTT-3’

5’-CCTTATCGTCGTTGCCAGAT-3’

IFN-α5’-TCCTCCAACACCTCTTCGAC-3’

5’-GGGCTGTAGGTGTGGTTCTG-3’

IFN-γ5’-GCTGATGGCAATCCTGTTTT-3’

5’-GGATTTTCAAGCCAGTCAGC-3’

MHC-I 5’-GAAGGAAGAGACTTCATTGCCTTGG-3’

5’-CTCTCCTCTCCAGTACGTCCTTCC-3’

MHC-II 5’-CCACCTTTACCAGCTTCGAG-3’

5’-CCGTTCTTCATCCAGGTGAT-3’

TLR-75’-CCTTTCCCAGAGAGCATTCA-3’

5’-TCAAGAAATATCAAGATAATCACATCA-3’

BAFF 5’-TGTGCACGTCATCCAACAGA-3’

5’-GCCACAGGAATGTGACAGGA-3’

CCL215’-GGAGAAGCAGAAGAACCCCC-3’

5’-GGGAAAGCATCCGTCCTCTC-3’

CCL195’-CCAGGAAGGTCCCAAATAAA-3’

5’-GTAGTAGGAGGTGGAAGCAAGTC-3’

TLR-35’-CAACACTCCGCCTAAGTATCATG-3’

5’-GCTATCCTCCACCCTTCAAAA-3’

β-defens in 5’-CCAGGTTTCTCCAGGATTGT-3’

5’-AACCCAAAGCAACTTCCAAC-3’。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的试剂盒不需要抗体试剂。

3.权利要求1或2所述的试剂盒在制备检测北京鸭免疫相关基因转录水平试剂中的应用。

4.Real-Time PCR检测北京鸭免疫相关基因转录水平的的方法，其特征在于包括如下步骤：一、采用RNAisoPlus抽提北京鸭组织中的总RNA；二，将抽提的mRNA反转录为cDNA；三、利用Real-Time PCR试剂盒检测免疫相关基因的转录水平，检测结果通过IBM SPSS Stat ist ics 20进行生物学统计分析。

5.根据权利要求4所述的Real-Time PCR检测北京鸭免疫相关基因转录水平的方法，其特征在于步骤三中所涉及的全部引物序对和Real-t ime PCR检测过程，其中引物序列权利要求1或2中所述；Real-t ime PCR过程如下：1、Real-Time PCR检测免疫相关基因的表达实验反应体系如下：2XPremix Ex Taq^TM II 10ul，cDNA 2ul，Forward primer(10pm)0.8ul，Reverse primer(10pm)0.8ul，ddH2O 6.4ul；2、反应程序如下：95℃30s,95℃5s，58.2℃30s，95℃30s，72℃30s，55℃-95℃15s+0.5℃/cycle。