[发明专利]一种建立人二倍体细胞代次的分界线和代次的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物细胞技术领域，具体涉及到一种建立人二倍体细胞代次的分界线和代次的检测方法。

背景技术

世界卫生组织在1999年就强调，用于人类疫苗生产的细胞基质，人二倍体细胞是理想的病毒繁殖载体，试生产人类疫苗的最佳细胞株，然而在哺乳类动物5400种里面能用于人类制备疫苗的细胞载体总共不超过5个系8株细胞，其中人二倍体细胞株含有6株，由此可以看出人二倍体细胞株制备疫苗的优势。这些生产用细胞株，是病毒性疫苗生产所需的关键生物材料。

细胞在培养的过程中不断的进行有丝分裂或者无丝分裂，对于人二倍体细胞培养来说，鉴别细胞的传代代次是非常重要的。

发明内容

本发明的目的是提供一种建立人二倍体细胞代次的分界线和代次的检测方法。

为达上述目的，本发明的一个实施例中提供了一种建立人二倍体细胞代次的分界线和代次的检测方法，包括：

A、将具有标示作用的标示基因植入人二倍体细胞中，获得带有标记基因的标记细胞；

B、按照一定比例，将标记细胞与正常细胞混合进行培养；

C、培养结束后，统计标记细胞占总细胞的比例。

综上所述，本发明具有以下优点：

本发明可以检测二倍体细胞的代次。

具体实施方式

实施例

1、取将要进行传代培养的人二倍体细胞，在其内部植入标记基因；然后进行培养，获得具有标示基因的标示细胞。

2、将具有标记基因的细胞与正常细胞进行混合培养，同时记录两者的比例，优先选择两者的比例A在1:10～1:20之间。

3、培养结束后，通过基因检测的方法，统计标记细胞与总细胞数量的比例B，并计算A与B的比值即为代次的粗略估算。