[发明专利]一种禽呼肠孤病毒培养方法

权利要求书

1.一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于是以vero细胞作为宿主细胞实施的。

2.根据权利要1所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1)在容积为100～500L的反应器中以4×10⁵～6×10⁵个/ml的密度接种宿主细胞悬液进行培养，至细胞密度为2×10⁶～3.5×10⁶个/ml，得到培养液；

2)向步骤1)得到的培养液中接种禽呼肠孤病毒，进行培养；

3)收获病毒。

3.根据权利要2所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于步骤1)接种的宿主细胞悬液是通过以下方法制备得到的：利用容积小于14L的反应器接种宿主细胞进行扩增，用细胞消化液对培养得到的培养液进行消化，得到细胞悬液。

4.根据权利要求3所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于进行消化的培养液中细胞密度不低于5×10⁶个/mL。

5.根据权利要3所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于所述细胞消化液配方为：0.25％胰酶、0.53mMEDTA。

6.根据权利要求5所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于所述细胞消化液pH为7.2～7.6。

7.根据权利要2所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于步骤1)的培养方法为搅拌式培养。

8.根据权利要2所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于步骤1)培养过程中培养液pH为7.0～7.4。

9.根据权利要2所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于步骤2)培养过程中培养液pH为7.2～7.5。

10.根据权利要1或2所述的一种禽呼肠孤病毒培养方法，其特征在于培养过程中培养液中具有微载体，所述微载体的加入量为8～10g/L。