[发明专利]一种微生物发酵提取仙草多糖的方法

权利要求书

1.一种微生物发酵法提取仙草多糖的方法，包括以下步骤：

1)粉碎：将干仙草原料粉碎至20-50目；

2)首次提取：将粉碎后的仙草装入发酵罐，加入4-8倍体积的沸腾的纯净水，调pH至4-6，保温提取后冷却；

3)发酵菌种子液的制备：黑曲霉和米曲霉经活化、扩增培养得到混合发酵菌种子液；

4)接种：发酵菌种子液在无菌条件下接种到发酵罐中，搅拌混合均匀；

5)发酵：密封静置发酵1-3天；

6)二次提取：发酵终止后，将发酵后的物料升温至沸腾，保温搅拌30min；

7)粗滤和分离：过滤除去200目以下的杂质，离心分离；

8)膜浓缩：浆体采用聚酰胺复合膜过滤，得仙草浓浆；

9)醇沉：向仙草浓浆中添加无水乙醇，搅拌10min后静置1-2h，冷却至10-15℃后离心分离，收集沉淀物；

10)干燥：90-100℃干燥至仙草多糖水分含量在5％以下。

2.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤2)中，提取时间为40-60min，提取后冷却至28-34℃。

3.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤3)中，黑曲霉和米曲霉经活化、扩增培养是将黑曲霉、米曲霉在25-28℃条件下，150-200转/分的摇床上扩增培养18-25小时，得到混合发酵种子液。

4.如权利要求1或3所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤3)中黑曲霉、米曲霉以2:1的比例进行扩增培养。

5.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤4)中发酵菌种子液按体积比5-10％的接种量接种至发酵罐中。

6.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤5)中，发酵的温度为28-34℃。

7.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤7)中，采取双层振动筛，上层为80目筛，下层为200目筛。

8.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤8)中，聚酰胺复合膜浓缩温度30-40℃，浓缩时间为60-120min，仙草浓浆出料浓度为15.0±1.0Brix。

9.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤9)中，添加无水乙醇的体积为仙草浓浆体积的50％-70％。

10.如权利要求1所述的微生物发酵法提取仙草多糖的方法，其特征在于：步骤10)中，干燥方式采用真空干燥或热风干燥。