[发明专利]一种多氨基硅包磁性纳米粒子的制备与应用

权利要求书

1.一种多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)合成磁性纳米粒子；

2)制备反相微乳液体系；

3)硅包与氨基化修饰：将磁性纳米粒子加入反相微乳液体系，在氨水催化作用下，水解TEOS和APTES，包被硅层的同时表面形成粗糙的网状结构，此结构表面携带大量的氨基基团，即为多氨基硅包磁性纳米粒子。

2.根据权利要求1所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述磁性纳米粒子为铁氧体磁性纳米粒子、合金磁性纳米粒子或磁性复合物纳米粒子。

3.根据权利要求1所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤1)中所述磁性纳米粒子是铁氧体磁性纳米粒子，且步骤1)的具体操作为：将摩尔比2:1的Fe³⁺和Fe²⁺相互混合，在氮气氛围下剧烈搅拌，然后加热到60-90℃后快速注入氨水调节pH为9-12，继续反应20-30min，室温冷却，磁性收集Fe₃O₄磁性纳米粒子并用乙醇和水洗涤，再用柠檬酸钠溶液超声处理20-40min，然后重新加入新鲜的柠檬酸钠溶液中搅拌3-12h，再次磁性收集Fe₃O₄之后再用乙醇和水洗涤，最后进行干燥。

4.根据权利要求1所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤2)制备反相微乳液体系的具体方法为：将环己烷、正己醇、曲拉通X-100、水以14-16:3-4:3-4:1的体积比混合，搅拌辅以超声分散，将步骤1)中制备的磁性纳米粒子加入到混合液中，继续超声分散一段时间，然后搅拌3-12h，形成反相微乳液体系。

5.根据权利要求1所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，步骤3)硅包与氨基化修饰的具体操作方法为：向步骤2)形成的反相微乳液体系中加入氨水，搅拌20-40min后加入TEOS，搅拌反应3-24h后，加入APTES，继续反应3-24h，加入丙酮破乳，然后用乙醇和水洗涤多次，干燥待用。

6.根据权利要求6所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法，其特征在于，向步骤2)形成的反相微乳液体系中加入氨水的体积与反相微乳液体系的体积比为1:100-600；加入TEOS的体积与反相微乳液体系的体积比为1:60-200；加入APTES的体积与反相微乳液体系的体积比为1:100-1800。

7.根据权利要求1-6任一项所述的多氨基硅包磁性纳米粒子的制备方法制备的多氨基硅包磁性纳米粒子。

8.如权利要求7所述的多氨基硅包磁性纳米粒子在非特异性或特异性的DNA分离中的应用。

9.一种利用权利要求7所述的多氨基硅包磁性纳米粒子非特异性吸附目标生物体基因组DNA的方法，其特征在于，包括步骤：制备含有待检测DNA的缓冲体系，将多氨基硅包磁性纳米粒子加入到缓冲体系中，90-100℃下振荡混合，然后加入脱脂奶粉溶液，在60℃下封闭，磁性分离，获得非特异性吸附有目标生物体基因组DNA的磁性分离物。

10.一种利用权利要求7所述的多氨基硅包磁性纳米粒子特异性杂交分离目标DNA序列的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将多氨基硅包磁性纳米粒子通过偶联剂戊二醛与氨基化修饰并具有多聚T连接臂的寡核苷酸序列结合，结合物用脱脂奶粉溶液进行封闭，经洗涤后，磁性收集磁性分离探针；

2)进行分离时，将磁性分离探针与目标分离序列在40-60℃混合30-120min，然后磁性分离。