[发明专利]基于UPLC-Q-TOF-MS技术实现对苦碟子注射液中化学成分的快速分类及鉴定

说明书

技术领域　

本发明涉及一种中药注射液中化学成分的鉴别，即基于UPLC-Q-TOF-MS技术实现对苦碟子注射液中化学成分的快速分类及鉴定。

背景技术

在现有技术中，苦碟子注射液为菊科苦荬菜属植物抱茎苦荬菜［Ixeris sonchifolia Hance］全草经提取加工制成。苦碟子的化学成分比较复杂，据文献报道其成分主要有萜类、黄酮类和香豆素类、甾醇等。其中主要活性成分，由于受产地、气候和生态环境等因素的影响，不同产地苦碟子所制成的注射液所含成分诧异很大。研究报道，从各种动植物中提取的多糖具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗衰老、抗病毒、抗辐射、降血脂、降血糖、美容等广泛的作用。

苦碟子注射液（曾用名：碟脉灵注射液）列入国家药品标准产品（国药准字Z20025450），由通化华夏药业有限责任公司生产。

处方：抱茎苦荬菜1000g，制成1000ml。

制法：取抱茎苦荬菜，加水煎煮二次，第一次1小时，第二次0.5小时，合并煎液，浓缩至每1ml相当于原生药0.5g，放冷至40℃以下，在搅拌下加10%氧化钙乳调节pH值至10，放置12小时，离心，离心沉淀物称重，悬浮于5.3倍量95%乙醇中（使含醇量达80%），加50%硫酸溶液调节pH值至3－4，充分搅拌使反应完全，离心，离心液加40%氢氧化钠溶液中和pH值至7.0，滤过，滤液回收乙醇，并挥尽乙醇，用注射用水稀释至每1ml相当于原生药4g，置-5℃以下放置12小时以上，滤过，滤液加0.1－0.2%药用活性炭粉末，煮沸15分钟，置-5℃以下放置24小时以上，滤过，滤液加注射用水稀释至规定量，调节pH值至7.0－7.5，滤过，灌封，灭菌即得。性状：本品为浅黄棕色至黄棕色的澄明液体。

含量测定：本品每10ml含总黄酮以无水芦丁（C₂₇H₃₀O₁₆）计，不得少于4.0mg。含抱茎苦荬菜以腺苷（C₁₀H₁₂N₅O₄）计，不得少于0.025mg。

功能主治：活血止痛，清热祛瘀。用于瘀血闭阻的胸痹，证见：胸闷、心痛，口苦，舌暗红或存瘀斑等。适用于冠心病、心绞痛见上述病状者。亦可用于脑梗塞者。

用法用量：静脉滴注，一次10－40ml，一日1次；用5%葡萄糖或0.9%氯化钠注射液稀释至250－500ml后应用；14天为一疗程；或遵医嘱。

规格：每支装（1）10ml，（2）20ml，（3）40ml。

目前许多分辨率高、灵敏度好的分析仪器如：GC-MS和LC-MS被用来对中药单味药或复方成分进行全谱表征。在药物分析过程中，我们通常采用UPLC-Q-TOF-MS技术对药物进行全谱扫描，然而基于UPLC-Q-TOF/MS的分析方法拥有谱图复杂，信息量大等问题，因此需要借助化学计量学对原始数据进行信息的挖掘与整合。如今，随着数据后处理技术的不断发展，诊断碎片过滤（Diagnostic fragments filter, PIF）与中性丢失过滤（Neutral loss, NIF）在化合物的筛选与鉴别方面显示出独特的优势（见：齐连文等，基于快速液相-飞行时间-质谱对人身皂苷进行表征，[J].色谱A.2012. 1230 : 93–99）。由于同一类别的化合物一般具有相同或者相似的公共骨架，分子可在质谱中裂解成碎片，可根据其中一些碎片推断出裂解的类型，进而判断分析进入质谱仪的分子，这些碎片被称为特征碎片；中性丢失指的是分子离子峰与高质荷比区域的一些碎片峰的质荷比的差值，这些中性碎片的丢失在高质荷比区域有很重要的鉴定价值（见：谢彤等, 基于麦冬的体内中药药动-药效物质基础发现与分类的理论方法. [J] 色谱A, 2012. 131(2) : 1747- 1824）。由此可见，将诊断碎片与中性丢失相结合的方法，将有助于实现对苦碟子注射液中复杂化学成分快速准确的分类与鉴定。中药注射液的化学成分表征是寻找药物有效成分及确认药物效应的基础，然而通过传统的液相色谱-紫外检测的分析手段得到的化合物指纹图谱往往存在灵敏度低且专一性差，不能得到确切结构信息的缺点。

发明内容