[发明专利]一种高得率的云芝多糖的制备方法

权利要求书

1.一种高得率的云芝多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将云芝子实体晾干至水分含量为15～20％，然后进行粉碎处理，得到200～300目的云芝粉，与蒸馏水按1：30-40的重量比混合成混合液后，备用；

(2)酶解处理：取占混合液重量0.1-0.2％的纤维素酶加入混合液中，调解pH值至4-6，在搅拌的过程中于40-55℃酶解40-80分钟；

(3)将云芝粉进行微波辅助热水提取，所述的微波功率为500-700W，提取时间为3-5分钟；然后继续进行超声波辅助热水提取，其超声温度20-60℃，功率为600-800W，超声时间为20-60min；然后将所得的云芝水提液冷却至室温，离心分离得上清液和云芝残渣；

(4)醇沉多糖：将步骤(3)所得上清液减压浓缩，加入2-4倍体积的无水乙醇进行醇沉后，离心，冷冻高燥后得云芝粗多糖；

(5)双水相萃取：将云芝粗多糖溶于水，得粗多糖溶液，加入聚合物/无机盐双水相体系中，在温度30-50℃、pH 4-7的条件下震荡30-50分钟，震荡速度为100-200r·min^-1，然后静置20-40分钟分层；所述的聚合物为聚乙二醇，无机盐为磷酸钾；所述的聚乙二醇浓度为10-20％，磷酸钾的浓度15-25％；

(6)取出富含无机盐的下层，采用大孔吸附树脂以2-4BV/h的流速对所得云芝粗多糖以5-10倍柱体积水进行洗脱除杂，洗脱流速为1-4BV/h，之后，调节pH值范围为6.5-7.5，采用阴阳离子交换树脂串联树脂柱脱蛋白处理；所述的阴离子交换树脂与阳离子树脂的质量比为1:2～5；

(7)用截留量为6000的超滤膜除盐，截留分子量范围为100000-800000D，工作压力为0.2-0.7Mpa，温度为30-50℃，转子的转速为300-800r/min，收集截留浓缩液，并用蒸馏水清洗，合并洗液与浓缩液，干燥，得到云芝多糖。