[发明专利]一种电化学传感器及其制备与应用有效
| 申请号: | 201410626360.2 | 申请日: | 2014-11-06 |
| 公开(公告)号: | CN104359957A | 公开(公告)日: | 2015-02-18 |
| 发明(设计)人: | 丁世家;颜玉蓉;张晔;袁泰先;李胜强;丁小娟;杨建儒;李新民;袁睿;吴茳铃 | 申请(专利权)人: | 重庆医科大学 |
| 主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327;C12Q1/68 |
| 代理公司: | 上海光华专利事务所 31219 | 代理人: | 郭婧婧 |
| 地址: | 400016*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 电化学传感器 及其 制备 应用 | ||
1.一种检测MicroRNA-21的电化学传感器,包括工作电极、参比电极和对电极,所述工作电极为在基底电极金电极表面固定针对MicroRNA-21的捕获探针所得。
2.根据权利要求1所述的电化学传感器,其特征在于,所述捕获探针为巯基修饰的捕获探针。
3.根据权利要求1所述的电化学传感器,其特征在于,所述捕获探针的序列如SEQ ID NO.1所示。
4.根据权利要求1所述的电化学传感器,其特征在于,所述参比电极选自饱和甘汞电极或银氯化银电极;所述对电极为铂丝电极。
5.根据权利要求1~4任一权利要求所述电化学传感器中的工作电极的制备方法,所述方法为先在基底电极金电极表面固定针对MicroRNA-21的捕获探针,而后进行封闭电极所得,具体包括如下步骤:
(1)金电极表面处理:将金电极表面进行抛光处理,使其表面光洁;
(2)固定针对MicroRNA-21的捕获探针:将捕获探针滴涂在处理干净的金电极表面;
(3)封闭电极:封闭非特异性吸附位点,即得工作电极。
6.一种检测MicroRNA-21的检测系统,包括如权利要求1~4任一权利要求所述的电化学免疫传感器。
7.根据权利要求6所述的检测系统,其特征在于,所述检测系统还包括液相扩增反应体系,所述液相扩增反应体系为至少包括两个针对MicroRNA-21的配对茎环H1、H2的缓冲液。
8.根据权利要求6所述的检测系统,其特征在于,所述茎环H1的序列SEQ ID NO.2~4所示;所述茎环H2的序列SEQ ID NO.5~10所示。
9.根据权利要求6所述的检测系统,其特征在于,所述检测系统还包括碱性磷酸酶标记的链霉亲和素和反应缓冲体系。
10.根据权利要求9所述的检测系统,其特征在于,所述反应缓冲体系为含α-NP的二乙醇胺缓冲液。
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