[发明专利]miRNA-378在脂肪肝治疗中的应用

权利要求书

1.一种活性成分的用途，其特征在于，所述的活性成分选自下组：

(a).miRNA-378，所述的miRNA-378的序列如SEQ ID NO.:1所示；

(b).前体miRNA，所述的前体miRNA能在宿主内加工成(a)中所述的miRNA-378；

(c).多核苷酸，所述的多核苷酸能被宿主转录形成(b)中所述的前体miRNA，并加工形成(a)中所述的miRNA-378；

(d).表达载体，所述表达载体含有(a)中所述的miRNA-378、或(b)中所述的前体miRNA、或(c)中所述的多核苷酸；

其中，所述的活性成分用于：

(i)制备抑制p110α基因或其蛋白表达和/或活性的药物组合物；和/或

(ii)制备治疗脂肪肝；和/或抑制肝内甘油三酯蓄积的药物组合物。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物包括所述的活性成分和药学上可接受的载体。

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的miRNA-378还用于制备治疗p110α相关肿瘤。

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物还含有额外的p110α抑制剂。

5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的药物组合物还包括任选的降脂药。

6.如权利要求5所述的用途，其特征在于，所述的降脂药包括：HMG—CoA还原酶抑制剂、烟酸及其衍生物、普罗布考和贝特类。

7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(b)所述的前体miRNA的核苷酸序列如SEQ IDNO.:2所示。

8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(c)中所述的多核苷酸具有式II所示的结构：

Seq_正向-X-Seq_反向

式II，

式II中，

Seq正向为能在宿主中被加工成所述的微小RNA核苷酸序列；

Seq反向为与Seq正向完全互补的核苷酸序列；

X为位于Seq正向和Seq反向之间的间隔序列，并且所述间隔序列与Seq正向和Seq反向不互补；

并且式II所示的结构在转入宿主细胞后，形成式III所示的二级结构：

式III中，Seq正向、Seq反向和X的定义如上述，

||表示在Seq正向和Seq反向之间形成的碱基互补配对关系。

9.如权利要求1所述的用途，其特征在于，(d)中所述的表达载体包括：病毒载体和非病毒载体。

10.一种筛选促进miRNA-378候选化合物的方法，其特征在于，包括步骤：

(a)将加入候选化合物的细胞培养体系作为实验组；将不加入候选化合物的细胞培养体系作为对照组；

(b)测试实验组和对照组中p110α蛋白的表达量和/或活性；

其中，当测试组中p110α蛋白的表达量和/或活性显著高于对照组，则表明该候选化合物为促进miRNA-378的物质。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述的细胞为肝细胞。

12.如权利要求10所述的方法，其特征在于，步骤(b)中还包括：

进一步测试所获得化合物对实验组或对照组中肝细胞内甘油三酯蓄积的抑制作用；

其中，当实验组中的肝细胞内甘油三酯蓄积显著低于对照组，则表明所述候选化合物为治疗脂肪肝的物质。

13.一种体外非治疗性的抑制p110α表达量和/或活性；和/或抑制肝细胞内甘油三酯蓄积的方法，其特征在于，包括步骤：

向细胞培养体系中加入miRNA-378，从而抑制p110α表达量和/或活性；和/或抑制肝细胞内甘油三酯蓄积。