[发明专利]咖啡酸苯乙酯在治疗急性放射性肝损伤中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了咖啡酸苯乙酯在急性放射性肝损伤中的一种治疗方法，属于生物医药领域。 

背景技术

原发性肝癌(primary liver cancer,PLC)是我国常见恶性肿瘤之一，手术治疗的病例占20％～30％。放疗作为非手术治疗肝癌中发挥着重要的作用。然而，放射性肝病(radiation induced liver disease，RILD)是影响肝癌放疗放射耐受剂量的最主要因素。轻度的急性放射性肝损伤多能修复，但严重的急性放射性肝损伤会发展为放射性肝病(radiation induced liver disease，RILD)。放射性肝病是腹部放疗中最严重的并发症之一，照射后2周至4个月时，以静脉闭塞性疾病(venous occlusive disease，VOD)为特征，之后逐渐进展，出现肝纤维化，肝内结缔组织大量增生，肝细胞片状变性坏死，肝纤维化一旦发生，将不可逆转，最终导致肝硬化，肝功能衰竭，严重影响患者生活质量，甚至威胁生命。 

咖啡酸苯乙酯(Caffeic acid phenethyl ester，CAPE)可清除自由基，减少辐射所致肝细胞凋亡，进而对急性放射性肝损伤起一定的防护作用。CAPE可通过降低一氧化氮合成酶(iNOS)蛋白表达，降低辐射诱导的(一氧化氮)NO的产生，减少辐射诱导肝细胞凋亡。CAPE是一种广泛存在于含有树脂的植物和蜂胶中的生物活性物质，能特异的抑制核转录因子P65(NF-κB p65)活化，抑制iNOS表达，减轻脂多糖(LPS)和γ干扰素(IFN-γ)诱导的肝脏炎性损伤。此外，CAPE的结构中含有儿茶酚苯基结构，为清除自由基的一种常见结构，是一种强抗氧化剂。iNOS的高表达参与了急性放射性肝损伤的发病过程，而CAPE可抑制iNOS的表达，减少iNOS催化合成的一氧化氮(NO)的产生，发挥抗炎作用，减轻辐射所致的急性放射性肝损伤。 

发明内容：

本发明公开了咖啡酸苯乙酯在急性放射性肝损伤中的一种治疗方法，用于治疗急性放射性肝损伤。 

本发明通过以下实验证明咖啡酸苯乙酯在急性放射性肝损伤中的治疗作用：将40只SD大鼠随机分为4组：A组(生理盐水+假放疗组)；B组(咖啡酸苯乙酯+假放疗组)；C组(咖啡酸苯乙酯+放疗组)；D组，(生理盐水+放疗组)。实验大鼠接受高能X线上腹部照射，并于照射后4天采血、处死，观察大鼠肝细胞凋亡情况、肝脏病理改变，检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量水平变化，观察肝脏中的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽(glutathione，GSH)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)活性变化，以及肝脏组织中一氧化氮合成酶表达水平。结果表明：咖啡酸苯乙酯可清除自由基，减少辐射所致肝细胞凋亡，进而对急性放射性肝损伤起一定的防护作用。咖啡酸苯乙酯可通过降低一氧化氮合成酶蛋白表达，降低辐射诱导的一氧化氮的产生，减少辐射诱导肝细胞凋亡。 

具体实施方式

下面的实例将具体说明本发明的操作方法，但不能作为对本发明的限定。 

各组大鼠均于照射及假照射后4天心脏采血、处死、摘除肝脏待用。全血标本避免溶血，取血样约1ml，静置2h后待用。取各组肝左叶固定部位肝组织，固定，行光镜及末端脱氧核苷酰基转移酶介导性dUTP切口末端标记(TUNEL)分析。并取肝组织固定后行电镜检查。 

1血清肝生化指标分析：大鼠血液样本静置2h后，以3000r/min离心5～8min，提取上层血清后，采用全自动生化分析仪进行丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)含量测定。A组与B组大鼠血清ALT、AST水平无明显差异(ALT：P＞0.05，AST：P＞0.05)，而D组与A组、C与B组比较，急性放射性肝损伤大鼠血清ALT、AST水平明显升高(P<0.001)，D组与C组比较升高更为明显(ALT:P<0.05，AST:P<0.05)(见表1)。CAPE能够减少辐射所致的肝细胞凋亡，减轻大鼠急性放射性肝损伤，对正常肝细胞和肝功能具有较好的保护作用。 

表1  大鼠血清ALT、AST水平及肝细胞凋亡指数(x±SD，n＝10) 

ALT：A vs.B P＞0.05，A vs.D P<0.001，B vs.C P<0.001，C vs.D P<0.05；