[发明专利]基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法在审
申请号: | 201410609647.4 | 申请日: | 2014-11-03 |
公开(公告)号: | CN104404094A | 公开(公告)日: | 2015-03-11 |
发明(设计)人: | 杨静峰;衣萌;董秀萍;朱蓓薇;高荣春;王枭;兰晰然 | 申请(专利权)人: | 大连工业大学 |
主分类号: | C12P13/00 | 分类号: | C12P13/00;C07C309/14;C07C303/44 |
代理公司: | 大连智慧专利事务所 21215 | 代理人: | 周志舰 |
地址: | 116034 辽*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 利用 转化 提取 牛磺酸 方法 | ||
1.一种基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、利用蛤制备反应液;
S2、取胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种,根据所选取的酶对所述反应液调节酶转化反应适宜的pH值,将所选取的酶加入所述反应液中进行酶转化反应;之后,灭酶活,得到酶转化溶液;
S3、所述酶转化溶液去除酸性、碱性蛋白质;
S4、通过超滤设备去除大分子物质,保留牛磺酸;
S5、电渗析脱除盐离子;
S6、通过强酸性阳离子交换树脂吸附收集牛磺酸流出液;
S7、流出液中加入乙醇,析出牛磺酸晶体。
2.根据权利要求1所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,S2步骤具体为:
S21、向所述反应液中加入溶液中干物质质量份数为0.1%~10%的胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶中的一种;调节pH至所用酶的适宜环境,20~50℃酶解0.5~10小时;
其中,适宜环境为:胃蛋白酶pH1~3、木瓜蛋白酶pH5~9、胰蛋白酶pH7~9、碱性蛋白酶pH8~11;
S22、冷却,调pH至6~8;
S23、80~100℃灭酶活5~30分钟。
3.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,S1步骤具体为:蛤肉按其体积比加入1:1~1:100的水之后进行匀浆处理,获得所述反应液;
或者,蛤水煮液浓缩至干物质含量为1%~30%之间,离心去除不溶于水的杂质,获得所述反应液。
4.根据权利要求3所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,所述水煮液为蛤加工过程中的废弃液。
5.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,所述步骤S3包括工序:
S31、向处理后的酶转化溶液中加1mol/L~6mol/L HCl调pH至2~4,即有酸性蛋白质沉淀,离心分离,取上清液:
S32、上清液用1mol/L~6mol/L NaOH调pH至8~10,即有碱性蛋白沉淀,离心分离,取上清液。
6.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,所述步骤S4包括如下步骤:将除蛋白后的溶液进行超滤处理,以超滤膜截去大分子的多肽多糖类物质,收集滤出液。
7.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,所述步骤S5中适宜的电渗析工艺参数为:电压1V~20V,流速0.5mL/min~4L/min,样品浓度1mg/mL~100mg/mL。
8.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,所述步骤S6包括如下工序:
将提取液通过强酸性阳离子交换树脂柱,蒸馏水洗脱,取电导率开始下降至稳定期间的流出液;
提取液上6×60cmNa+型强酸性树脂柱,上样体积为300mL,蒸馏水洗脱,洗脱速度为20mL/min,接取电导率开始下降至电导率稳定期间的流出液。
9.根据权利要求1或2所述基于蛤利用酶转化法提取牛磺酸的方法,其特征在于,其特征在于,所述步骤S7包括如下工序:
S71、上述流出液经减压浓缩,加3倍体积95%乙醇,置于4℃环境下,析出牛磺酸。
S72、粗品牛磺酸加适量水溶解,再用95%乙醇重结晶,反复2~3次,可得到纯度较高的牛磺酸晶体。
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