[发明专利]一种检测细胞NF-κB信号通路的PCR试剂及其应用

说明书

技术领域

本发明属于分子生物学领域，尤其涉及一种检测细胞NF-κB信号通路的PCR试剂及其应用。

背景技术

NF-κB信号通路是存在于生物体内的一条极其重要的信号传导通路，尤其是对凋亡的调节起着非常重要的作用。目前，已经建立起来的NF-κB信号通路包括经典通路和非经典通路。NF-κB的经典信号通路和非经典信号通路的主要区别就在于：在NF-κB的经典信号通路中，IκB蛋白的降解使NF-κB二聚体得到释放。而在NF-κB非经典信号通路中，则是通过P100到P52的加工处理，使信号通路激活。而在NF-κB信号通路的终止中，IκB蛋白家族是至关重要的。而NF-κB通路如何被阻断以抑制肿瘤的发展一直是NF-κB信号通路的谜团和研究热点之一。

目前研究核心信号通路的核心分子调控机制，已经成为治疗肿瘤的一种关键手段，尤其是近年来NF-κB信号通路在肝癌中的研究，已经成为研究开发肝癌药物研发领域的急需解决的重要问题。

发明内容

本发明针对现有技术中如何确定NF-κB核心信号分子的调控，如何解释核心分子在肿瘤细胞中的变化的困难，提供了一种检测细胞NF-κB信号通路的PCR试剂及其应用，本发明将涉及细胞NF-κB的信号分子集中在一个平板上，通过做一次实时荧光定量PCR反应，反应细胞的生存状态，探讨在肝癌细胞系中引起NF-κB信号通路变化的可能靶分子与靶途径，为研究核心NF-κB信号蛋白的调节提供最直接的证据。

为实现上述发明目的，本发明采用下述技术方案予以实现：

一种检测细胞NF-κB信号通路的PCR试剂，它包括以下引物：

(1)检测CD40基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TGGGGTCAAGCAGATTGCTA-3'；

5'-CAGATGACACATTGGAGAAGA-3'；

(2)检测IL10基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CAAGGCGCATGTGAACTCC-3'；

5'-ATGTCAAACTCACTCATGGCT-3'；

(3)检测CD83基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-AAGCTGGCATGGAACGAG-3'；

5'-GTCTTGTGAGGAGTCACTAGC-3'；

(4)检测EGFR基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GGCACGAGTAACAAGCTCAC-3'；

5'-TGAGGACATAACCAGCCACC-3'；

(5)检测FASLG基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TTTAACAGGCAAGTCCAACTCA-3'；

5'-GCCACCCTTCTTATACTTCACT-3'；

(6)检测IL1A基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCATGTAAGCTATGGCCCACT-3'；

5'-TTCCCGTTGGTTGCTACTAC-3'；

(7)检测IL1B基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCGACACATGGGATAACGAGG-3'；

5'-TTTTGCTGTGAGTCCCGGAG-3'；

(8)检测IL1R1基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GCCAGTTGAGTGACATTGCT-3'；

5'-GTGATGAGGGTACTCCTTCTTT-3'；

(9)检测IL8基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CTGAGAGTGATTGAGAGTGGAC-3'；

5'-ACCCTCTGCACCCAGTTTTC-3'；

(10)检测LTBR基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-CAGTCCGACACAACCTGC-3'；

5'-TACAGGATTGGGTCCCTCTC-3'；

(11)检测NOD1基因的的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-GCGACCACGTCCTGCTAT-3'；

5'-AGGTTGGTGAACTGGAAGTG-3'；

(12)检测TLR1基因的PCR反应引物，其引物序列如下：

5'-TCAAACGTGAAGCTACAGGG-3'；

5'-CGAACACATCGCTGACAACT-3'；