[发明专利]复方氨基酸（15）双肽（2）注射液氨基酸和甘氨酰谷氨酰胺含量检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种氨基酸制剂的含量检测方法，特别是复方氨基酸(15)双肽(2)注射液氨基酸和甘氨酰谷氨酰胺含量检测方法。

背景技术

复方氨基酸(15)双肽(2)注射液为15种氨基酸和2种二肽组成的灭菌水溶液，处方为每1000ml含有：L-丙氨酸(C₃H₇NO₂)16.00g，L-精氨酸(C₆H₁₄N₄O₂)11.30g，L-天冬氨酸(C₄H₇NO₄)3.4g，L-谷氨酸(C₅H₉NO₄)5.60g，L-组氨酸(C₆H₉N₃O₂)6.80g，L-异亮氨酸(C₆H₁₃NO₂)5.60g，L-亮氨酸(C₆H₁₃NO₂)7.90g，L-赖氨酸醋酸盐(C₆H₁₄N₂O₂·C₂H₄O₂)12.70_g，L-蛋氨酸(C₅H₁₁NO₂S)5.60g，L-苯丙氨酸(C₉H₁₁NO₂)5.85g，L-脯氨酸(C₅H₉NO₂)6.80g，L-丝氨酸(C₃H₇NO₃)4.50g，L-苏氨酸(C₄H₉NO₃)5.60g，L-色氨酸(C₁₁H₁₂N₂O₂)1.90g，L-缬氨酸(C₅H₁₁NO₂)7.30g，一水合甘氨酰谷氨酰胺(C₇H₁₃N₃O₄·H₂O)30.27g，二水合甘氨酰酪氨酸3.45g(相当于甘氨酸0.94g；酪氨酸2.28g)

该产品含18种人体必须或非必须氨基酸组成的肠外营养注射剂，根据患者肠外营养的需要提供相应的氨基酸，其中甘氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸三种氨基酸以甘氨酸-谷氨酰胺、甘氨酰-酪氨酸的双肽形式存在。两种双肽(甘氨酰-谷氨酰胺、甘氨酰-酪氨酸)用于提供谷氨酰胺和酪氨酸以促进蛋白质的合成，在体内直接完全分解为甘氨酸、谷氨酰胺、酪氨酸三种游离氨基酸。

由于复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中成分复杂，对其各组分进行定量分析较为困难。现有技术如中国专利CN103134892A公开了复方氨基酸(15)双肽(2)注射液的分析方法，采用高效液相色谱检测方法，色谱条件为采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的反相色谱柱检测，检测波长为265-280nm，流动相由流动相A和流动相B组成，流动相A为甲醇，流动相B是通过缓冲溶液调节的pH值2.0-4.0的水溶液，但此方法只是测定的色氨酸和甘氨酰-酪氨酸的含量；叶晓林等人在《复方氨基酸(15)双肽(2)注射液中两组分的含量测定》(中国药业，2008年07期)中报道了用反相高效色谱法测定氨基酸(15)双肽(2)注射液中两种多肽，即甘氨酰-谷氨酰胺(GQ)和甘氨酰-酪氨酸(GY)的含量，该文献公开的方法，使用乙腈与0.05mol/L的磷酸二氢钠溶液作为流动相，采用了梯度淋洗法，并且还采用了FDNB进行了柱前衍生化处理，该方法检测方法复杂，操作步骤多，而且不能同时检测出十五中氨基酸的含量。

发明内容