[发明专利]一种异香豆素类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明属于植物化学技术领域，具体涉及一种源于烟草的异香豆素类化合物及其制备方法与应用。

背景技术

烟草是世界上化学成分最为复杂的植物之一，次生代谢产物非常丰富，据1982年Dube和Green等报道，烟草中已鉴定出的化学成分就超过2549种，到2008年，Rodgman和perfetti的报道称，烟草、烟草代用品以及卷烟烟气中发现的化合物总数大约为8700种。目前，人们从烟草中鉴定出来的单体化学物质就超过3000多种，而且还有许多成分尚未鉴定出来。烟草除主要用于卷烟抽吸用途外，还可从中提取多种有利用价值的化学成分，从中发现有开发利用价值的先导性化合物。

异香豆素是一些天然产物的基本结构，广泛分布于自然界中，种类繁多，特别是最近发现其衍生物具有抗病毒、抗菌、消炎、抗癌、抑制蛋白酶和除草等生理和生物活性。同时已有研究证实，其药理作用与化学结构密切相关，为了研究这类化合物的构效关系，可进一步研究和开发更多的异香豆素类化合物，从中寻找有效的先导化合物和活性基团。本发明从烟草中分离得到了一种具有抗烟草花叶病毒活性的异香豆素类化合物，该化合物至今尚未见到相关报道。

发明内容

本发明的第一方面在于提供一种新型的异香豆素类化合物，其分子式为C₁₅H₁₆O₄，经过分析化学鉴定，其具有下述结构：

根据有机化合物的系统命名法，该化合物被命名为2-(羟甲基)-8,8-二甲基-9,10-二氢吡喃[4,3-f]苯并吡喃-4(8H)-酮。

该化合物为白色固体，本发明人将其命名为“烟草异香豆乙素”，并将其英文名称命名为：tabaisocoumarin-B。

本发明的第二方面提供了上述第一方面所述的异香豆素类化合物的制备方法，该方法包括如下步骤：

a.制备烟草提取物浸膏：以烟草全株为原料，将其粉碎并用第一溶剂浸泡并提取所述烟草2～4次，每次24h～48h，将提取液合并、过滤并浓缩后得到所述烟草提取物浸膏；其中所述第一溶剂是选自乙醇、甲醇或丙酮的有机溶剂与水的混合物，其中有机溶剂占该第一溶剂的75wt％～100wt％，且第一溶剂：烟草＝2～4:1，重量比；

b.硅胶柱层析：将上述烟草提取物浸膏用选自纯甲醇、纯乙醇或纯丙酮的第二溶剂溶解后与为烟草提取物浸膏的0.8～1.5重量倍的60～120目硅胶拌样，将拌样后的混合物再与为烟草提取物浸膏的2～5重量倍的120～300目硅胶混合后干法装柱，然后用体积比依次为20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1的一系列氯仿-丙酮溶液进行梯度洗脱，收集其中用体积比为10:1的氯仿-丙酮溶液洗脱时得到的洗脱液，称为第一洗脱液；

c.中压液相色谱柱层析：将所述第一洗脱液用1.0～2.0重量倍的甲醇稀释后与0.8-1.5重量倍的中压液相色谱柱反向柱填料混合后装柱，用甲醇体积浓度依次为40％、55％、70％、85％、100％的甲醇水溶液进行梯度洗脱，保留其中用甲醇体积浓度为55％的甲醇水溶液洗脱时得到的洗脱液，称为第二洗脱液；

d.高压液相色谱分离：将上述第二洗脱液通入高压液相色谱进行分离纯化，该高压液相色谱采用21.2mm×250mm，5μm的C₁₈色谱柱，流动相为46wt％的甲醇水溶液，流动相流速为12mL/min，紫外检测器检测波长为322nm，第二洗脱液液每次进样120μL～200μL，收集每次进样后色谱峰保留时间为38.0min时所对应的洗脱液，称为第三洗脱液，将该第三洗脱液脱除溶剂后即得所述异香豆素类化合物。

前述中压液相色谱是指使用时压力在0.5-2Mpa的反相制备色谱，所述高压是指使用时压力在5-15Mpa的反相制备色谱。

本发明的第三方面提供了第一方面所述的异香豆素类化合物在制备抗烟草花叶病药物中的应用。

附图说明

图1为本发明的新型异香豆素类化合物的核磁共振碳谱。

图2为本发明的新型异香豆素类化合物的核磁共振氢谱。

图3为本发明的新型异香豆素按照天然产物化学中的经典编号方法的碳原子编号图，在下面结合该产物的各种谱图来鉴定该产物的结构过程中，使用了该经典编号方法。

图4为已知化合物6,8-二羟基-3-羟基甲基-异香豆素的结构。

图5为本发明的新型异香豆素类化合物的主要¹H-¹H COSY和HMBC相关图示。