[发明专利]铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片检测试剂盒有效

专利信息
申请号: 201410596866.3 申请日: 2014-10-30
公开(公告)号: CN104313166A 公开(公告)日: 2015-01-28
发明(设计)人: 梁冰;孙青菊;黄宁 申请(专利权)人: 中国人民解放军济南军区第四〇一医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 266071 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 铜绿 假单胞菌 多重 耐药 基因 液态 芯片 检测 试剂盒
【说明书】:

技术领域

发明涉及一种铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片检测试剂盒,属于生物检测技术领域。

背景技术

2010年,随着“超级细菌”这一名词频繁地见诸报端,细菌多重耐药、抗生素的合理使用重返人们视线。超级细菌其实并非新事物,它不是一个细菌的名称,而是一类细菌的名称,这一类细菌的共性是对几乎所有的抗生素都有强劲的耐药性,它们一直存在并且随着人类滥用抗生素而进化出强大耐药性。细菌耐药性,尤其是多重耐药性(multidrugresistance,MDR)已经成为非常严重的医疗问题及社会问题。

细菌耐药机理十分复杂,在抗生素的压力选择下,临床细菌耐药状况的日益恶化。细菌耐药性的检测与监测对于正确的目标性抗感染治疗以及监测细菌耐药性变迁和耐药菌感染的流行病学调查,制定防控细菌耐药性增加的措施至关重要。然而,目前临床实验室多采用耐药表型的检测方法,其检测周期长时效性差、检测通量低、影响因素多是最主要的问题,不能满足目前临床抗感染治疗和医院感染控制的要求。

液态芯片(又称流式荧光技术、液相芯片、悬浮阵列等)是在后基因组时代发展起来的新一代标准化开放式高通量技术平台,它有机地整合了编码微球、激光技术、应用流体学、最新的高速数字信号处理器和计算机运算法则,具有高通量、高速度、低成本、灵敏度高、重复性好、线性范围广等优点,可广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究,也是是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是:利用液态芯片技术,提供一种铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片检测试剂盒。

本发明所述铜绿假单胞菌8个多重耐药基因包括OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP。

为解决上述技术问题,本发明采用的技术方案是:

铜绿假单胞菌多重耐药基因液态芯片检测试剂盒,所述铜绿假单胞菌多重耐药基因包括OPRD2、TEM、OXA10、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP共8个耐药基因,其特征在于,试剂盒包括核酸扩增组份和杂交组份;

核酸扩增组份具体包括下列成分:

预混液:含有dATP、dTTP、dCTP、dGTP、MgCl2的Tris-HCl缓冲液;

引物混合液:8对耐药基因的引物混合液;

聚合酶:含甘油和稳定剂配方的DNA聚合酶;阳性质控品:含OPRD2、TEM、OXAl0、AAC3、AAC6、VIM、VEB、IMP基因的阳性菌株混合液;

阴性质控品:灭菌水;

杂交组份具体包括下列成分:

微球杂交液:为8种包被探针的微球混合悬液;

链霉亲和素-藻红蛋白:含链霉亲和素-藻红蛋白的Tris-HCl和EDTA缓冲液;

上述8个耐药基因的引物序列为:

上述8个耐药基因的探针序列为:

耐药基因探针序列

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