[发明专利]一种应用生物酶的红霉素制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及抗生素发酵制备领域，特别是涉及一种红霉素的发酵制备方法。

背景技术

红霉素属大环内脂类抗生素,它的抗菌谱和青霉素相似,特别对革兰氏阳性细菌、抗酸杆菌、立克次氏体及大病毒有抗菌活性,是治疗耐药性金黄色葡萄球菌感染和溶血性链球菌感染所引起疾病的首选药物,临床上可用于对青霉素过敏的患者。近年来，随着红霉素临床应用领域的扩大和以阿奇霉素、罗红霉素、克拉霉素等为代表的新型半合成红霉素的出现，红霉素生产和销售日趋活跃。

红霉素发酵是采用一种放线菌(红色链霉菌)作为产生菌，经过复壮、分离、孢子培养制备成斜面孢子备用，然后将斜面孢子接入种子罐进行种子扩大培养，最后接入发酵复合培养基，通过对培养温度、PH、基质浓度等参数的控制，使其最大限度的产生红霉素的过程。目前国外红霉素发酵水平明显高于国内，因此，本领域迫切需要提供一种新的红霉素发酵制备方法，提高红霉素发酵水平，从而提高红霉素产量、降低发酵成本。

发明内容

提高红霉素发酵生产水平的主要途径一是改变菌种原有性能，进行诱变筛选或基因工程技术获得高产菌种，二是优化培养基组成成分和培养条件。本发明的目的在于通过优化发酵工艺提供一种简单可行、发酵水平高的红霉素制备方法。

一种应用生物酶的红霉素制备方法，包括以下步骤：

(1)取红色链霉菌按8～12％的接种量接种于一级种子培养基中，在30～32℃培养24～36h，通过调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在30％以上，培养即得一级种子液；

(2)将所述一级种子液按8～12％的接种量接种于二级种子培养基中，在30～32℃培养24～36h，通过调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在30％以上，培养即得二级种子液；

(3)将所述二级种子液按8～12％的接种量接种于发酵培养基中，在30～32℃培养，开始培养12～15h后，按每升培养基添加10～20u脂肪酶的比例添加脂肪酶，并开始按每升培养基流加豆油1.2～1.5g/h的比例添加豆油，培养24～30h后，按每升培养基添加10～20u蛋白酶的比例添加蛋白酶，并开始按每升培养基流加玉米浆0.6～0.9g/h的比例添加玉米浆，培养140～160h后，红霉素效价不再上升，终止培养，整个培养过程中，控制pH为6.9～7.1，通过调整搅拌转速或通入无菌空气控制溶氧在30％以上，其中，所述发酵培养基的成分为：葡萄糖15～25g/L、淀粉30～50g/L、黄豆饼粉25～35g/L、玉米浆10～20g/L、硫酸铵1～2g/L、豆油8～15g/L、氯化钠3～6g/L、碳酸钙5～10g/L、泡敌0.1～0.2g/L；

其中，步骤(1)中的所述一级种子培养基和步骤(2)中的所述二级种子培养基的成分都为：葡萄糖20～40g/L、淀粉20～40g/L、黄豆饼粉20～30g/L、玉米浆10～20g/L、硫酸铵3～5g/L、豆油6～10g/L、氯化钠3～6g/L、碳酸钙5～10g/L、泡敌0.1～0.2g/L。

在其中一个实施例中，所述一级种子培养基、所述二级种子培养基的成分都为：葡萄糖30g/L、淀粉30g/L、黄豆饼粉25g/L、玉米浆15g/L、硫酸铵4g/L、豆油8g/L、氯化钠4g/L、碳酸钙10g/L、泡敌0.1g/L。

在其中一个实施例中，步骤(2)中，所述发酵培养基的成分为：葡萄糖20g/L、淀粉40g/L、黄豆饼粉30g/L、玉米浆15g/L、硫酸铵1.5g/L、豆油12g/L、氯化钠4g/L、碳酸钙10g/L、泡敌0.1g/L。

在其中一个实施例中，步骤(3)中，通过添加氨水的方式控制pH为6.9～7.1。

上述应用生物酶的红霉素制备方法，通过发酵培养基及培养过程的控制的优化，特别是通过引入生物酶，提高了原料利用率及红霉素的发酵水平，简化工艺，降低了生产成本。

附图说明

图1为一实施方式的应用生物酶的红霉素制备方法流程图。

具体实施方式

为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。

请参阅图1，一实施方式的应用生物酶的红霉素制备方法，包括以下步骤: