[发明专利]高效液相色谱法测定阿哌沙班清洗残留量

说明书

技术领域

本发明涉及一种高效液相色谱法测定阿哌沙班清洗残留量，属于化学 

制药检测领域。

背景技术

原料药生产工艺中不可避免的涉及到共有设备的问题，共有环节中切换产品，如果设备清洗不完全，上一次生产的物料残留必然会带入下一次生产的物料中，由于药物毒性的不同，残留量的大小会直接影响到药物的安全性和药品质量，故控制清洗残留达到合理限度是非常必要性的，且也是作为最低制药要求的GMP法规要求的。一般的，产品中允许杂质在安全允许的范围内存在，因此，采用一定的仪器分析方法检测产品中的阿哌沙班的清洗残留评价清洗效果和用药安全是非常必须的，也是非常紧迫的。 

目前，国内尚未有药典和相关文献提出该物质的检测方法，对微量残留的检测更不相关报道。 

对于阿哌沙班残留量的的检测，依靠化学或一般紫外设备是很难达到微量ppm级别检测要求，同时还要保证良好的线性范围，良好的稳定性，较好的准确度和精确度，该研究的方法可以操作简单、快速，测定结果准确可靠，从而可以有效的控制阿哌沙班的残留量，保证药用的安全性和可靠性。 

因此，本研究采用HPLC法,建立了一种阿哌沙班清洗残留量的测定方法。 

发明内容

本发明的目的是提供一种操作简单、快速，测定结果准确可靠阿哌沙班清洗残留的测定方法，来评价清洁效果，以保证药品质量和用药安全。 

本发明采用的技术方案为：高效液相色谱法测定阿哌沙班清洗，其创新点在于：包括样品配制、样品测定和含量计算步骤；所述样品配制步骤如下： 

（1）空白溶液配制：清洗用溶剂甲醇；

（2）对照溶液贮备液（0.5mg/mL）配制：称取阿哌沙班对照品25mg于50mL量瓶中，用稀释剂溶解，定容至刻度，过滤得对照溶液；

（3）对照溶液（0.0005mg/mL）配制：精密量取对照贮备液1.0mL于100mL量瓶中，定容至刻度，摇匀；再精密量取上述溶液1mL于10mL量瓶中，定容至刻度，摇匀；

所述的样品测定步骤为选用型号为岛津Inertsil ODS-3V 5μm 250×4.6mm的色谱柱，采用双泵系统，所用流动相A：30mmol/L 乙酸铵水溶液（称取2.31g乙酸铵至1L水中，混匀）B：乙腈，设定色谱检测波长为280nm，流速为1.0 mLmin^-1；灵敏度为1.0 AUFS；柱温为40℃；进样量为10 μL，分别将样品溶液、对照溶液和空白溶液进行样品测定；

所述含量测定步骤为以外标法计算样品阿哌沙班的残留量。

  

进一步的，所述流动相A为30mmol/L 乙酸铵水溶液（称取2.31g乙酸铵至1L水中，混匀），水为2次重蒸水，符合HPLC要求。

进一步的，流动相B乙腈溶液为色谱纯乙腈。 

进一步的，所述波长为280nm，改波长为阿哌沙班的最大吸收波长，且对溶剂甲醇等无干扰。 

进一步的，检测柱温为40℃，能够有效改善峰型和有效检测微量残留。 

有益效果：本发明的这种高效液相色谱法测定阿哌沙班清洗残留量，操作简单、快速，测定结果准确可靠，从而能有效地评价设备清洗效果；本发明在流动相的选择上采用了280nm，有效降低检测限度；本发明在色谱柱温度选择上，使用40℃，能够有效改善峰型和有效检测微量残留，在溶剂的选择上选择甲醇，甲醇该波长无吸收，避免溶剂对检测的干扰，提高检测方法的可靠性。 

附图说明

下面结合附图和实施例进行进一步说明。 

图1为本发明专属性试验图谱。 

图2为精密度试验图谱。 

图3为检测限图谱。 

图4为对照溶液为0.00005的图谱。

图5为1000%的对照溶液的图谱。 

图6为100%的对照溶液的图谱。 

图7为150%的对照溶液的图谱。 

图8为120%的对照溶液的图谱。 

图9为80%的对照溶液的图谱。 

具体实施方式

下面的实施列可以使本专业技术人员更全面的理解本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。 

实施例1

高效液相色谱法测定阿哌沙班清洗残留方法：