[发明专利]硫酸依替米星的连续色谱分离纯化方法

说明书

技术领域

本发明属于化学制药领域，特别涉及一种抗菌药物依替米星的分离纯化方法。

背景技术

硫酸依替米星(Etimicin sulfate)的结构式如下：

是一种半合成氨基糖苷类抗生素，是唯一获得国家一类新药证书的抗感染药物。本品适用于对其敏感的大肠埃希杆菌、克雷伯氏肺炎杆菌、沙雷氏杆菌属、枸橡酸杆菌、肠杆菌属、不动杆菌属、变形杆菌属、流感嗜血杆菌、铜绿假单胞菌和葡萄球菌等引起的各种感染。临床研究显示本品对以下感染有较好的疗效:呼吸道感染:如急性支气管炎、慢性支气管炎急性发作、社区肺部感染等。肾脏和泌尿生殖系统感染:如急性肾孟肾炎、膀胱炎、慢性肾盂肾炎或慢性膀胱炎急性发作等。皮肤软组织和其它感染:如皮肤及软组织感染、外伤、创伤和手术产后的感染及其他敏感菌感染。同时具有较低的耳、肾毒性不良反应发生率，证明了硫酸依替米星是临床应用中高效、安全的新一代半合成氨基糖苷类抗生素。

申请号：93112412.3的中国专利公开了一种生产硫酸依替米星的方法。其主要步骤为：庆大霉素C1a碱在溶剂中加入醋酸钴、乙酸酐，生成3，2″，6″，-三-N-乙酰基庆大霉素C1a(P1)，经过提取浓缩，浓缩液通入硫化氢气体除去钴离子，经初步分离得到纯度为90％的P1，然后加入乙醛，在0～5℃冰水浴中用还原剂氢化，得到3，2″，6″，-三-N-乙酰基-1-N-乙基庆大霉素C1a(依替米星)，经吸附型大孔树脂分离后得到纯度较高的依替米星，纯度较高的依替米星加入1N的氢氧化钠溶液，水解回流48小时，得到依替米星水解液，水解液经吸附型大孔树脂分离得到纯度为90％以上的1-N-乙基庆大霉素C1a(依替米星)溶液，加酸成盐，活性炭脱色，冷冻干燥，即得依替米星盐。

但是，在依替米星水解液中含有大量的结构特征以及性质都比较相似的杂质(庆大霉素C1a碱、1-N-乙基加洛糖胺、3-N-乙基庆大霉素C1a碱、1,3-N,N-二乙基加洛糖胺，1,3-N,N-二乙基庆大霉素C1a碱等)。目前提纯主要采用的是固定床树脂分离法。该传统分离方法分离得到的依替米星存在纯度低、生产收率低、水和洗脱剂消耗大、周期长、环保压力大等诸多缺点。因此需要开发高效的分离提纯工艺，以提高产品质量，提倡绿色化学。

发明内容

本发明的目的在于提供一种得到高纯度的依替米星的方法─采用连续色谱分离系统组合纳滤膜技术使依替米星水解液能够更有效地得到分离纯化。

本发明提供一种硫酸依替米星的连续色谱分离纯化方法，所述方法步骤如下：

步骤1，依替米星水解液上连续色谱柱，得到洗脱液；

步骤2，洗脱液经过浓缩，干燥得到依替米星纯品，纯度≥95％，水分≤5％；

其中，步骤1所述上连续色谱柱，方法如下：

色谱柱数量是20～40根；

树脂选自D103、HPD100、华震层析1号、华震层析2号、JK006、DK110、D110、DK-1、D101、YPR-Ⅱ，

树脂孔径为30～100目，

色谱柱分为吸附区、洗杂区、解吸区、再生清洗区四个区，各区的色谱柱分别采用串联或并联方式连接；洗杂区用去0～0.5mol/L的氨水洗涤；解吸区采用乙醇溶液洗脱，解吸溶剂为10wt％～50wt％乙醇溶液；再生清洗区，依次用乙醇，水交替活化再生。

其中，步骤2所述浓缩干燥，方法如下：

浓缩采用真空浓缩，操作条件为真空度0.02～0.15Mpa，操作温度为35～90℃，浓缩至依替米星质量浓度为15％～70％，得到浓缩液；浓缩液用冷冻干燥或喷雾干燥的方法得固体，ELSD测定依替米星纯度≥95％，水分≤5％；

上连续色谱柱前，可以将依替米星水解液稀释至依替米星质量浓度为1％～40％。

连续色谱柱选自连续色谱用圆盘传送式连续色谱分离系统或者模拟移动床式连续色谱分离系统，两种系统均能达到本发明所要的效果。

本发明所述模拟移动床式连续色谱分离系统，所述系统分为吸附区、洗杂区、解吸区、再生清洗区四个区，其中

1)吸附区：3～8根柱；控制流速，依替米星水解液从2或8号柱进入，1号柱出。

2)洗杂区：3～6根柱；经吸附后，树脂柱转到洗杂区，控制流速，同样为逆向进柱。

3)解吸区：7～12根柱；各柱子之间为串、并连接。控制流速，采用不同浓度的氨水或乙醇解吸，且全部采用正进料。

4)再生清洗区：4～7根柱；控制流速，正、逆向单独进料；洗脱剂回收利用。