[发明专利]一种具有抗肿瘤活性的化合物、其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种酮类化合物，尤其涉及一种从植物绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum)中提取得到的具有抗肿瘤活性的皂苷类化合物；本发明还涉及该皂苷类化合物的制备方法以及该化合物在医药中的应用，属于植物化学领域。

背景技术

绞股蓝为葫芦科(Cucurbitaceae)绞股蓝属(Gynostemma)绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino的全草，目前国内有绞股蓝茶、绞股蓝浓缩汁、绞股蓝龙须茶、富硒养生茶等多个系列产品。现代药理学表明，绞股蓝具有抗癌作用、抗氧化作用、降血糖作用、降血脂作用、增强免疫作用等。

在天然植物中有些有较强活性的皂苷类化合物，来源有限而且存在于植物内的含量较低，用传统的分离方法，不但需要大量的药用资源，而且得率也低。因此，如何提高稀有活性成分的含量或获得更有活性的成分成为现代药学研究的重点。研究表明，人参属植物经加热处理后其生物活性之所以显著增强是因为热处理后原药材中的低极性、稀有或微量人参皂苷，如稀有人参皂苷Rh2、Rg3、Rb3等，含量明显增加。具有“南方人参”美誉的绞股蓝中最主要的药效成分是皂苷类成分，本实验室前期研究发现，经高温高压处理的绞股蓝中的侧链C20位连有羟基的绞股蓝皂苷(如gypenoside L和gypenoside LI等)以及具有C20(21)和C20(22)双键的绞股蓝皂苷(如达木林B和达木林A等)等稀有绞股蓝皂苷含量明显增加，药效学实验验证其抗癌作用大大增强。鉴于此，我们对热处理的绞股蓝进行了进一步的提取、分离与活性实验。

发明内容

本发明人在对绞股蓝热处理产物的有效成分研究中分离得到具有结构式(I)的新化合物，在现有文献中从未报道，于是对其进一步进行了药理实验，从而完成了本发明。

本发明目的之一是提供一种下述式(I)的化合物：

其中，R₁、R₂和R₃彼此独立选自OH或糖基；R₄和R₅分别选自H或OH，且二者互异；

优选的：R₁或R₃为OH；R₂为糖基；R₄或R₅为OH；

特别优选的，所述化合物的结构式为式(II)所示：

本发明的另外一个目的是提供制备上述式(I)化合物的方法。

本发明的另外一个目的是通过以下技术方案来实现的：

一种制备上述式(I)化合物的方法，包括：

(1)将植物绞股蓝的干燥全草的粗粉在高温高压下热处理后，用乙醇回流提取，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；

(2)乙醇提取浸膏加蒸馏水混悬后，用二氯甲烷萃取，再用乙酸乙酯萃取；回收溶剂，得乙酸乙酯萃取物；

(3)将乙酸乙酯萃取物通过HP20树脂，用20％乙醇、50％乙醇洗脱后，用70％乙醇进行洗脱，70％乙醇洗脱液减压浓缩，得70％乙醇洗脱物；将70％乙醇洗脱物上硅胶柱色谱，用20∶1～10∶1体积比的二氯甲烷/甲醇洗脱，分段收集洗脱液得到6个组分，将其中第3个组分用半制备色谱柱(250×10mm，5μm)，流速为3mL/min，用53∶47体积比的乙腈/水洗脱，即得。

上述制备方法中，步骤(1)中优选将绞股蓝干燥全草的粗粉在125℃、0.24MPa条件下热处理3h，用90％乙醇回流提取3次，3次回流提取的时间依次为2h、2h和1h；合并提取液，提取液减压回收溶剂，得乙醇提取浸膏；

步骤(2)中优选将乙醇提取浸膏加10倍重量的蒸馏水混悬，用二氯甲烷萃取，再用乙酸乙酯萃取，回收溶剂后得乙酸乙酯萃取物。

本发明式(I)化合物具有较强的抑制癌细胞增殖活性，具体来说具有(I)化合物结构的绞股蓝皂苷gypenoside L，已有文献报道其对肿瘤细胞具有较明显的抑制作用。

附图说明

图1本发明化合物绞股蓝皂苷Jh1(gypenoside Jh1)的LC-MS图谱

图2化合物绞股蓝皂苷Jh1(gypenoside Jh1)和gypenoside L对HepG2细胞株的抑制率曲线，图中“*”表示p＜0.05，“**”表示p＜0.01

具体实施方式

实施例1本发明化合物的制备