[发明专利]红豆多酚含量的测定方法在审
申请号: | 201410569886.1 | 申请日: | 2014-10-23 |
公开(公告)号: | CN104330369A | 公开(公告)日: | 2015-02-04 |
发明(设计)人: | 李勇;刘文斌 | 申请(专利权)人: | 西安莹朴生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 西安亿诺专利代理有限公司 61220 | 代理人: | 康凯 |
地址: | 710000 陕西省西*** | 国省代码: | 陕西;61 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 红豆 含量 测定 方法 | ||
技术领域
本发明涉及一种红豆多酚含量的测定方法,属于食品添加剂及其检测方法领域。
背景技术
近年来,多酚类物质的生物活性及对人体的保健防病作用日益受到人们的关注。多酚类物质广泛存在于植物中,具有清除机体内自由基、抗脂质氧化、延缓机体衰老、预防心血管疾病、防癌、抗辐射等生物活性功能。现在研究最多的是茶多酚、大豆异黄酮、银杏黄酮和葡萄籽多酚。
红豆是我国主要的五谷杂粮之一,种植范围广,产量大,但红豆的加工还停留在初级食用阶段,而从红豆中提取红豆多酚是红豆深加工之一。红豆中多酚类物质含量丰富,提取方便,具有较高的利用价值和很好的应用前景,但红豆因产地不同,其含多酚类物质含量不同。
因为,研究一种准确度高、重复性高、操作简便的红豆多酚含量的测定方法很有必要。
发明内容
本发明旨在提供一种准确度高、重复性高、操作简便的红豆多酚含量的测定方法。
所述的红豆多酚含量的测定方法,包括以下步骤:
准确吸取浓度为0.25mg/ml的没食子酸丙酯标准液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,置于一系列25ml的容量瓶中,加水至体积为5ml,再加入酒石酸铁试剂5ml,然后用pH7.5的磷酸缓冲溶液定容至25ml,混匀,静置15min,在540nm处测定吸光度值。以没食子酸丙酯标准液的浓度为横坐标,以其吸光度值为纵坐标,绘制成标准工作曲线。精确称红豆多酚样品0.01g,置于25ml的容量瓶中,加入10ml蒸馏水溶解,摇匀后再加入5ml酒石酸铁试剂,然后用pH7.5的磷酸缓冲溶液定容至25ml,混匀,静置15min,在540nm处测定吸光度值,根据标准工作曲线和试样吸光度计算其含量。
优选的,本发明所述的酒石酸铁试剂为称取硫酸亚铁1.0g,酒石酸钾钠5.0g,加蒸馏水溶解并定容至1L。
更优选的,本发明所述的标准液为称取在100℃下干燥1h的没食子酸丙酯25mg,置于100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,浓度为0.25mg/ml。
进一步优选的,本发明所述的磷酸缓冲溶液为将0.0667mol/1磷酸氢二钠溶液与0.0667mol.1磷酸二氢钾溶液按84:16的比例混合,调节pH至7.5,即得。
经测定,本发明所述的检测方法得到的标准液回归方程为:
Y(含量)=12.743X(吸光度)-0.0062,R=0.9996
标样回收率为99.8%-101.3%,符合分析要求,各检测结果准确可靠。
本发明所述的检测方法,利用多酚类物质能与亚铁离子生成紫蓝色络合物,以没食子酸丙酯为标准品,采用分光光度法测定其含量。经测定,本发明所述的测定方法具有准确度高、重复性高、操作简便等特点。
具体实施方式
实施例一:
(1)标准回归方程测定:
酒石酸铁试剂:称取硫酸亚铁1.0g,酒石酸钾钠5.0g,加蒸馏水溶解并定容至1L,备用。
标准液:称取在100℃下干燥1h的没食子酸丙酯25mg,置于100ml容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度,浓度为0.25mg/ml,备用。
磷酸缓冲溶液:将0.0667mol/1磷酸氢二钠溶液与0.0667mol.1磷酸二氢钾溶液按84:16的比例混合,调节pH至7.5,即得。
准确吸取浓度为0.25mg/ml的没食子酸丙酯标准液0,1.0,2.0,3.0,4.0,5.0ml,置于一系列25ml的容量瓶中,加水至体积为5ml,再加入酒石酸铁试剂5ml,然后用pH7.5的磷酸缓冲溶液定容至25ml,混匀,静置15min,在540nm处测定吸光度值。以没食子酸丙酯标准液的浓度为横坐标,以其吸光度值为纵坐标,绘制成标准工作曲线。
Y(含量)=12.743X(吸光度)-0.0062,R=0.9996
(2)试样测定及计算
精确称红豆多酚样品0.01g,置于25ml的容量瓶中,加入10ml蒸馏水溶解,摇匀后再加入5ml酒石酸铁试剂,然后用pH7.5的磷酸缓冲溶液定容至25ml,混匀,静置15min,在540nm处测定吸光度值,根据标准工作曲线和试样吸光度计算其含量。
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