[发明专利]一种枯草芽孢杆菌菌株、生防菌剂及其制备方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于植物保护技术技术领域，涉及一种枯草芽孢杆菌菌wdcjxq2266，利用该菌株生产的生防菌剂，以及该菌株和生防菌剂在防治辣椒疫病中的应用。

背景技术

辣椒疫病是由辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian)引起的一种细菌性病害。辣椒疫霉菌的寄主范围较广，除辣椒外还能寄生番茄、茄子和一些瓜类作物。病菌以卵孢子在土壤中或病残体中越冬，借风、雨、灌水及其他农事活动传播。发病后可产生新的孢子囊，形成游动孢子进行再侵染。病菌生育温度范围为10～37℃，最适宜温度为20～30℃。空气相对湿度达90％以上时发病迅速；重茬、低洼地、排水不良，氮肥使用偏多、密度过大、植株衰弱均有利于该病的发生和蔓延。这种病害由于地理分布范围广，寄主范围广，所以一旦侵染非常容易造成毁灭性打击，到目前为止还没有有效的防治手段。

辣椒是我国重要的经济作物，疫病一直是辣椒上的重要病害，近年来，随着设施蔬菜种植面积的扩大和连作密度的加大，发病趋势更加严重，据调查，严重时减产50％以上，甚至造成毁灭性的危害。

长期以来，国内外对辣椒疫病的防治多从农业防治和化学防治出发,虽然取得了一定的防效，但始终未能很好控制该病害的发生，且造成了一定程度的环境污染。生物防治由于其自身的优点开始受到越来越多的重视，利用微生物制剂防治辣椒疫病取得了一些进展，但效果并不理想。综上所述，开发新的、更为高效和安全的微生物杀菌剂控制辣椒疫病的发生是实现农业安全可持续发展的需要，符合社会发展要求。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中防治辣椒疫病的制剂防治效果不理想，易造成环境污染的问题，提供一种枯草芽孢杆菌菌株、包括该菌株的生防菌剂及该菌剂的制备，以及二者在防治辣椒疫病上的应用。

本发明的目的通过以下技术方案实现

1.本发明提供一种枯草芽孢杆菌菌株，所述枯草芽孢杆菌菌株(Bacillus subtilis)的名称为wdcjxq2266，于2014年4月3日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为CGMCC NO.8993，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。菌落特征：单个细胞0.7～0.8×2～3微米，着色均匀。无荚膜，周生鞭毛，能运动。革兰氏阳性菌，芽孢0.6～0.9×1.0～1.5微米，椭圆到柱状，位于菌体中央或稍偏，芽孢形成后菌体不膨大。菌落表面粗糙不透明，污白色或微黄色，在液体培养基中生长时，常形成皱醭。需氧菌。可利用蛋白质、多种糖及淀粉，分解色氨酸形成吲哚。

2.本发明还提供一种生防菌剂，所述的生防菌剂包括上述1提供的枯草芽孢杆菌菌株wdcjxq2266。

3.上述2提供的生防菌剂，其中，菌剂成品中活菌总浓度为1×10⁹～1×10¹⁰CFU/mL。

4.上述3提供的生防菌剂，该生防菌剂主要由上述1提供的枯草芽孢杆菌菌株wdcjxq2266经菌体活化、种子培养、扩大培养后得到的。

5.上述2-4任一项所述的生防菌剂的制备方法，其中，将上述1提供防治辣椒疫病的生防菌株wdcjxq2266在LB培养液28℃180rpm振荡培养12-24h，然后4000rpm离心10min，用灭菌水进行稀释制成菌剂，菌剂成品中活菌总浓度为1×10⁹～1×10¹⁰CFU/mL。

6.上述1提供的枯草芽孢杆菌菌株在防治辣椒疫病中的应用。

7.上述2提供的生防菌剂在防治辣椒疫病中的应用。

8.上述7提供的应用，该应用方法为，在使用前，将该菌剂成品稀释10-100倍，在辣椒种植时浸种处理或在移栽时进行灌根处理达到防治辣椒疫病的作用。

9.上述2提供的生防菌剂在辣椒促生增产中的应用

本发明的有益效果：

1.生防制剂中含有抑制辣椒疫病病原菌生长的专一性菌株枯草芽孢杆菌菌株wdcjxq2266，其抑菌效果非常明显，经过试验证明，本发明提供的生防制剂在室温条件下对辣椒疫病的防效可以达到69.06％,施入土壤中可以形成优势群，并能保持活性存活下来。

2.本发明的芽孢杆菌菌株wdcjxq2266，生产工艺简单、培养时间短、成本低，且该菌株可以通过简单、快捷低成本的制备方法获得防治辣椒疫病的生防制剂。