[发明专利]一种犬干扰素α融合蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.编码犬干扰素α融合蛋白的核酸序列，其特征在于，所述核酸序列具有如SEQ ID No：1所示之序列。

2.如权利要求1所述之核酸序列，其特征在于，所述之核酸序列包含位于N端的NusA核酸序列和位于C端的犬干扰素α核酸序列，所述NusA核酸序列与所述犬干扰素α核酸序列之间由EcoR I酶切序列连接。

3.如权利要求1所述之核酸序列，其特征在于，所述之犬干扰素α核酸序列是针对大肠杆菌表达系统密码子偏好性优化过的核酸序列；所述之犬干扰素α核酸序列具有如SEQ ID No：3所示之序列。

4.一种犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白包含一NusA蛋白和一犬干扰素α；编码所述犬干扰素α融合蛋白的核酸序列如SEQ ID No：1所示。

5.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白包含位于氮端的大肠杆菌NusA蛋白和位于碳端的犬干扰素α蛋白，所述NusA蛋白与所述犬干扰素α蛋白之间由双肽Glu-Phe连接。

6.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白具有如SEQ ID No：5所示之序列。

7.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白为可溶性蛋白。

8.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白不需要酶切即具有抗病毒活性。

9.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白具有高稳定性。

10.如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白在制备犬抗病毒药物中的应用。

11.一种利用犬干扰素α融合蛋白抑制犬病毒活性的方法，其中，所述犬干扰素α融合蛋白为如权利要求3所述的无需酶切即具有抗病毒活性的可溶性蛋白。

12.一种犬干扰素α融合蛋白的制备方法，其特征在于，其步骤包括，将犬干扰素α的DNA序列按照大肠杆菌表达系统的密码子偏爱性优化密码子，通过克隆技术连接到表达NusA蛋白的载体pET44a中，形成编码犬干扰素α融合蛋白的重组质粒，再将该质粒转化进大肠杆菌BL21表达系统中，经诱导表达而产生犬干扰素α融合蛋白；当诱导温度为18℃-25℃时，所表达的犬干扰素α融合蛋白为可溶性表达；经过镍离子亲和层析纯化，透析除盐，得到如权利要求3所述的犬干扰素α融合蛋白。

13.如权利要求12所述的制备方法，其特征在于，所述犬干扰素α融合蛋白为不需要酶切即具有抗病毒活性的可溶性蛋白。