[发明专利]复方木尼孜其制剂的指纹图谱检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种复方木尼孜其制剂的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，属于中药检测领域。

背景技术

复方木尼孜其制剂收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》维吾尔药分册。标准号为WS₃-BW-0161-98。本方剂收载于维吾尔族古籍著名药典《卡日巴丁卡德尔》，至今已有1500年的历史。复方木尼孜其制剂处方由茴香根皮、洋甘菊、芹菜根、骆驼蓬子、茴芹果等药材组成。用于调节体液及气质，为四种异常体液的成熟剂。复方木尼孜其制剂为多组分复杂体系，因此评价其质量应采用与之相适应的，能提供丰富鉴别信息的检测方法，但现行的显微鉴别、理化鉴别等方法都不足以解决这一问题，建立指纹图谱将能较为全面地反映其所含化学成分的种类与数量，进而对药品质量进行整体描述和评价，为控制和保证产品质量的稳定性提供保障。

目前，对复方木尼孜其制剂的鉴定，往往是选取复方木尼孜其制剂的一两种中药成分进行鉴定，比如其现行标准中使用骆驼蓬子对照药材对其进行鉴别；还有文献公开了复方木尼孜其制剂中甘草酸铵HPLC含量测定方法。

复方木尼孜其制剂是由茴香根皮、洋甘菊、芹菜根等制成的，临床报道其可以治疗痤疮、湿疹等症，其治疗效果已经得到临床的验证，并且在不断发掘其效果，能够保证药物的质量以及复方木尼孜其制剂中有效成分含量，是决定复方木尼孜其制剂疗效的基础。如果用一两种成分的活性成分来说明复方木尼孜其制剂的内在质量，具有一定的片面性，指纹图谱作为中草药及其提取物的质量控制方法，目前已经成为国际共识。如何能更全面地以复方木尼孜其制剂中化学成分为指标建立宏观指纹图谱的方法却未见报道。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种复方木尼孜其制剂的指纹图谱检测方法，该方法是由取复方木尼孜其颗粒加入水，加热溶解，冷却，采用水饱和正丁醇萃取，合并萃取液，蒸干后加入甲醇溶解过滤，作为供试品溶液；再取哈马林对照品溶液；分别取对照品溶液与供试品溶液注入高效液相色谱仪，记录60分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得复方木尼孜其制剂的指纹图谱。通过对比所得复方木尼孜其制剂的指纹图谱，确定共有峰9个，得到标准指纹图谱。本发明所提供的方法建立的复方木尼孜其制剂HPLC指纹图谱与对照图谱的相似度均大于0.9，能有效的表征其质量，有利于全面监控产品的质量；本发明建立了复方木尼孜其制剂HPLC特征指纹图谱共有模式，标定了9个共有峰，并成功的表征了复方木尼孜其制剂中所含3种药材(骆驼蓬子、甘草、黑种草子)的特征成分，建立的指纹图谱技术含量高，避免了复方木尼孜其制剂质量控制的单一性和片面性，减少了人为处理产品质量达标的可能性。该方法简便、稳定、精密度高、重现性好，能从整体特征面貌上控制复方木尼孜其制剂的质量，保证其质量稳定、可控，从而确保复方木尼孜其制剂的安全性和有效性，为复方木尼孜其制剂的质量控制提供科学的依据。

本发明中所述的一种复方木尼孜其制剂的指纹图谱检测方法，该方法以哈马林对照品为参照，采用高效液相色谱法测定其指纹图谱，具体操作按下列步骤进行：

a、供试品溶液的制备：取复方木尼孜颗粒15g，精密称定，加入10-30ml水，加热溶解，冷却，采用水饱和正丁醇萃取2-3次，每次10-40ml，合并萃取液，蒸干后加入浓度为30-70％甲醇5ml溶解过滤，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液，作为供试品溶液；

b、对照品溶液的制备：取哈马林对照品，精密称定，加入甲醇制成每lml含哈马林0.3mg的溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；

c、测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-15μl，注入高效液相色谱仪，记录60分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得复方木尼孜其颗粒的指纹图谱。

步骤c中高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以含0.6％乙酸的0.68％乙酸铵缓冲盐溶液为流动相B，梯度洗脱，流动相A、B的比例变化为：0-5min，A相5％，B相95％；5-25min，A相18％，B相82％；25-30min，A相18％，B相82％；30-45min，A相32％，B相68％；45-60min，A相70％，B30％；流速0.5-1.5ml·min-1，柱温28-42℃，采用蒸发光散射检测器温度55-65℃，理论塔板数按哈马林峰计算应不低于2000。

步骤c中得到的复方木尼孜其制剂的指纹图谱中有9个共有峰，由这9个共有峰构成复方木尼孜其制剂的指纹特征，作为复方木尼孜其制剂成分的标准指纹图谱。