[发明专利]一种散沫花组织培养的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及散沫花的组织培养，属于生物技术领域。

背景技术

散沫花，Lawsonia alba Lam.，别称指甲柴、指甲花、海娜，千屈菜科，无毛大灌木，高可达6米，小枝略呈4棱形，叶交互对生，薄革质，椭圆形或椭圆状披针形，长1.5-5厘米，宽1-2厘米，顶端短尖，基部楔形或渐狭成叶柄，侧脉5对，纤细，在两面微凸起，花序长可达40厘米，花极香，白色或玫瑰红色至朱红色，直径约6毫米，盛开时达8-10毫米，花萼长2-5毫米，4深裂，裂片阔卵状三角形，花瓣4，略长于萼裂，边缘内卷，有齿，雄蕊通常8，花丝丝状，长为花萼裂片的2倍，子房近球形，花柱丝状，略长于雄蕊，柱头钻状，蒴果扁球形，直径6-7毫米，通常有4条凹痕，种子多数，肥厚，三角状尖塔形，花期6-10月，果期12月，分布于世界各热带地方，广东、广西、云南、福建、江苏、浙江等省区有栽培，散沫花是一种药用植物，叶：苦，凉，清热解毒，用于治疗外伤出血，疮疡；树皮：用于治疗黄疸，精神病。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供散沫花组织培养的快速繁殖方法，本发明旨在寻找适合散沫花组培快繁的优化方案，建立其无性快繁体系，为散沫花人工育苗提供科学完善的理论基础。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

选择幼嫩的顶芽在75%酒精中浸泡30s，0.1%升汞灭菌10min，无菌水冲洗4次，浸于120mg/L的利福平溶液中振荡预培养4d，消毒处理过的无菌顶芽接种到BL+MET5mg/L的培养基中，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强1500lx，培养出来的芽接入培养基BL+NAA0.2-0.25mg/L+6-BA2-2.5mg/L+20%椰乳中进行增殖培养，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强2000lx，培养出来的芽放入培养室中松盖5d后开盖2d，栽植于基质为珍珠岩：黄沙：泥炭=1:1:1中，放置于恒温光照培养箱中，光强12000lx，温度25℃。

采用本发明制备的散沫花成活率高，培养周期短，操作简单易控，利于大规模种植。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

选择幼嫩的顶芽在75%酒精中浸泡30s，0.1%升汞灭菌10min，无菌水冲洗4次，浸于120mg/L的利福平溶液中振荡预培养4d，消毒处理过的无菌顶芽接种到BL+MET5mg/L的培养基中，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强1500lx，培养出来的芽接入培养基BL+NAA0.2mg/L+6-BA2mg/L+20%椰乳中进行增殖培养，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强2000lx，培养出来的芽放入培养室中松盖5d后开盖2d，栽植于基质为珍珠岩：黄沙：泥炭=1:1:1中，放置于恒温光照培养箱中，光强12000lx，温度25℃，成活率89%。

实施例2

选择幼嫩的顶芽在75%酒精中浸泡30s，0.1%升汞灭菌10min，无菌水冲洗4次，浸于120mg/L的利福平溶液中振荡预培养4d，消毒处理过的无菌顶芽接种到BL+MET5mg/L的培养基中，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强1500lx，培养出来的芽接入培养基BL+NAA0.25mg/L+6-BA2.5mg/L+20%椰乳中进行增殖培养，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强2000lx，培养出来的芽放入培养室中松盖5d后开盖2d，栽植于基质为珍珠岩：黄沙：泥炭=1:1:1中，放置于恒温光照培养箱中，光强12000lx，温度25℃，成活率90%。

实施例3

选择幼嫩的顶芽在75%酒精中浸泡30s，0.1%升汞灭菌10min，无菌水冲洗4次，浸于120mg/L的利福平溶液中振荡预培养4d，消毒处理过的无菌顶芽接种到BL+MET5mg/L的培养基中，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强1500lx，培养出来的芽接入培养基BL+NAA0.25mg/L+6-BA2mg/L+20%椰乳中进行增殖培养，附加麦芽糖30g/L，琼脂6.5g/L，培养温度25±1℃，空气湿度75%，日光灯照明，每日光照时间16h，光强2000lx，培养出来的芽放入培养室中松盖5d后开盖2d，栽植于基质为珍珠岩：黄沙：泥炭=1:1:1中，放置于恒温光照培养箱中，光强12000lx，温度25℃，成活率91%。