[发明专利]一种绿叶五味子植株再生的快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。

背景技术

绿叶五味子，Schisandra viridis A. C. Smith，五味子科，别名内风消、小血藤、过山风、落叶木质藤本，全株无毛，小枝具稀疏细纵条纹，当年生枝紫褐色，短枝间疏离，二年生枝变灰褐色，叶纸质，卵状椭圆形，通常最宽处在中部以下，长4-16厘米，宽2-4（7）厘米，先端渐尖，基部钝或阔楔形，中上部边缘有胼胝质齿尖的粗锯齿或波状疏齿，上面绿色，下面浅绿色，干时榄绿色，侧脉每边3-6条，网脉稀疏而明显。分布于安徽、浙江、江西、福建、湖南、广东、广西、贵州等地，生于250-1200m的林中、山坡路旁及山沟溪边。功效：祛风活血；行气止痛，主治：风湿骨痛；胃痛；疝气痛；月经不调；荨麻疹；带状疱疹。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供假地蓝植株再生的快速繁殖方法，本研究采用组织培养的方法对绿叶五味子进行快速繁殖，组织培养时间短，增殖率高和全能生产等优点，比大田生产快得多，能保持母本的遗传性状和生物特性，在短时内种植于田间，可以加强对种质资源的保护。

本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：

取绿叶五味子新抽出的幼嫩叶片，用10%的过氧化氢处理8min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的绿叶五味子叶片接入培养基为1/2MN+2，4-D0.5mg/L+TDZ0.5mg/L+5mg/L硝酸银进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度23±2℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基1/2MN+6-BA0.8-1.0mg/L+CM25-30%+CH500mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度23±2℃，将绿叶五味子分化出来的芽苗放入恒温28℃的智能人工气候培养柜内培养，培养条件为光照时间24h/d，光照强度2000lx。

采用本发明制备的绿叶五味子成活率高，周期短，产量大，能耗少，利于大规模种植。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取绿叶五味子新抽出的幼嫩叶片，用10%的过氧化氢处理8min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的绿叶五味子叶片接入培养基为1/2MN+2，4-D0.5mg/L+TDZ0.5mg/L+5mg/L硝酸银进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度23±2℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基1/2MN+6-BA0.8mg/L+CM25%+CH500mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度23±2℃，将绿叶五味子分化出来的芽苗放入恒温28℃的智能人工气候培养柜内培养，培养条件为光照时间24h/d，光照强度2000lx，生根率92%。

实施例2

取绿叶五味子新抽出的幼嫩叶片，用10%的过氧化氢处理8min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的绿叶五味子叶片接入培养基为1/2MN+2，4-D0.5mg/L+TDZ0.5mg/L+5mg/L硝酸银进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度23±2℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基1/2MN+6-BA1.0mg/L+CM30%+CH500mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度23±2℃，将绿叶五味子分化出来的芽苗放入恒温28℃的智能人工气候培养柜内培养，培养条件为光照时间24h/d，光照强度2000lx，生根率93%。

实施例3

取绿叶五味子新抽出的幼嫩叶片，用10%的过氧化氢处理8min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的绿叶五味子叶片接入培养基为1/2MN+2，4-D0.5mg/L+TDZ0.5mg/L+5mg/L硝酸银进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度23±2℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基1/2MN+6-BA1.0mg/L+CM25%+CH500mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度23±2℃，将绿叶五味子分化出来的芽苗放入恒温28℃的智能人工气候培养柜内培养，培养条件为光照时间24h/d，光照强度2000lx，生根率94%。