[发明专利]一种刺桐组织培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410550345.4 | 申请日: | 2014-10-17 |
公开(公告)号: | CN104285799A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京帝道农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 刺桐 组织培养 快速 繁殖 方法 | ||
1. 一种刺桐组织培养的快速繁殖方法,包括茎段的消毒、腋芽的诱导、丛生芽的增殖、生根诱导、炼苗移栽,其主要步骤如下:
(1)取刺桐的带芽茎段,进行消毒处理;
(2)将步骤(1)消毒处理过的刺桐带芽茎段接种到1/2Miller+0.1mg/L2,4,5-D+0.1mg/LIAA+1-2mg/L谷胱甘肽的培养基中进行腋芽的诱导,附加蔗糖25g/L,琼脂9g/L,培养温度26℃,光照强度2000lx,光照时间11h/d,pH5.8,培养基采用121℃、1.1kp进行高压灭菌15min;
(3)取步骤(2)诱导出来的腋芽接入Miller+0.5mg/LZT+0.1mg/LNAA+IAA0.1mg/L培养基中进行丛生芽的增殖,培养条件同上;
(4)将步骤(3)培养出来的丛生芽接入培养基为1/2Miller+1mg/LIBA+0.5mg/LIAA进行生根诱导,附加蔗糖20g/L,琼脂8g/L,培养温度28℃,光照强度7000lx,光照时间15h/d,pH5.8,培养基采用121℃、1.1kp进行高压灭菌15min;
(5)将步骤(4)生根后的无菌苗进行野外炼苗移栽。
2. 按照权利要求1所述的一种刺桐组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(1)中所述刺桐无菌茎段的获得为切取3cm的刺桐带芽茎段放入500ml磨口广口瓶中,包上纱布,流水冲洗30min,在超净工作台上先用50%的Bleach水溶液消毒4min,之后迅速用无菌水洗涤3次,再用0.2%的升汞溶液灭菌12min,最后用无菌水洗涤5次。
3. 按照权利要求1所述的一种刺桐组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(2)中刺桐的腋芽诱导培养基中附加15-20mg/L的夹竹桃霉素,防止内生菌的生成。
4. 按照权利要求1所述的一种刺桐组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤中的培养条件均采用人工光照,封闭式。
5. 按照权利要求1所述的一种刺桐组织培养的快速繁殖方法,其特征在于:步骤(5)中刺桐的野外炼苗移栽的方法为揭开封口膜,在培养室内放置7d,然后取出单苗洗净根上附带的培养基,把根浸入800-1000倍的多菌灵溶液消毒3min,栽植于草炭:珍珠岩=1:1的基质里,栽植后10d内用塑料薄膜保湿,以1/4MS营养液进行叶面喷洒。
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