[发明专利]一种携带Notch-1 shRNA的靶向磁性荧光纳米载体及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种核壳结构的磁性荧光纳米载体，磁性内核为Fe3O4外壳为SiO2，其特征在于：所述纳米载体的二氧化硅壳层内部掺杂荧光染料，纳米载体表面修饰有叶酸作为靶向分子，携带Notch-1shRNA质粒作为靶向基因。

2.一种如权利要求1所述的靶向磁性荧光纳米载体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

A.将异硫氰酸荧光素(FITC)、氨丙基三甲氧基硅烷(APTMS)溶于无水乙醇中，避光，摇床震荡，形成APTMS-FITC；

B.将磁流体和氨水溶于稀释的无水乙醇中，置于摇床震荡，再将正硅酸乙酯(TEOS)加入其中，置于摇床震荡形成Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子；

C.将APTMS-FITC与Fe₃O₄@SiO₂纳米粒子混合，置于摇床震荡，形成Fe₃O₄@SiO₂(FITC)；

D.向N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和N,N’-二环己基碳二亚胺(DCC)的混合溶液中加入叶酸，置于摇床中震荡，进行叶酸活化，向其中加入PEI，收集沉淀物，溶于双蒸水中，制得PEI-FA悬液；

E.将Fe₃O₄@SiO₂(FITC)和PEI-FA悬液混合，磁力搅拌，得到Fe₃O₄@SiO₂(FITC)/PEI-FA纳米载体；

F.将上述Fe₃O₄@SiO₂(FITC)/PEI-FA溶液混合质粒DNA，室温反应得到携带基因的靶向磁性荧光纳米载体。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤A中所述的FITC的浓度为0.1-1mg/ml，FITC与APTMS的体积比为10-50:1。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤B中所述磁流体与氨水的体积比为1-10:1，所加入的TEOS的量占总体积的1％-10％。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤C所述的APTMS-FITC的加入量占总体积的10％-50％。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤D中加入DCC和NHS的体积比为0.1-1:1；加入叶酸的量占总体积的10％-60％；加入PEI的终浓度为0.5％-5％。

7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于步骤E中所述的Fe₃O₄@SiO₂(FITC)和PEI-FA的质量比为1-10:1。

8.一种如权利要求1或2所述的靶向磁性荧光纳米载体，在生物医学领域中的应用。