[发明专利]一种肉苁蓉多肽提取物、制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种从肉苁蓉中提取肉苁蓉多肽提取物的方法，及其由此方法获得的肉苁蓉多肽提取物和该肉苁蓉多肽提取物的用途。

背景技术

肉苁蓉(Cistanche deserticola Y．C．Ma)是列当科(Orobanchaeceae)肉苁蓉属(Cistanche)植物肉苁蓉干燥带鳞叶的肉质茎，叉名精笋、纵蓉、肉松蓉、地精、大芸，有“沙漠人参”之美誉，始记载于《神农本草经》，列为上品，是常用中药之一，具有补肾壮阳、填精补髓、养血润燥、悦色延年等功效。本属植物全球约18个种，我国约4个种1个变种，分别为肉苁蓉、盐生肉苁蓉、管花肉苁蓉、白花盐肉苁蓉及沙苁蓉，除沙苁蓉外，其他4种主产于我国西北各省区。

20世纪80年代初日本学者开始研究肉苁蓉的化学成分。到20世纪80年代后期，国内学者开始研究我国产出的肉苁蓉的化学成分。随着提取分离和检测技术的飞速发展，已分离得到苯乙醇苷类、环烯醚萜类、挥发性成分、木脂素类、多糖、生物碱等多种化学成分。

现代药理学研究也证明肉苁蓉除具有补肾壮阳、润肠通便作用外，还具有抗衰老的作用，并且没有发现不良反应。近年来肉苁蓉广泛应用于各类药品及保健品中。

肉从蓉传统的初加工方法有晾晒法、盐渍法、窖藏法等，这些方法费工费时，受自然条件的影响，且质量不稳定，严重影响药材的利用率及疗效；并且，传统的初加工方法己远远不能满足产地大量药材初加工的需要。因此，如何提高珍稀濒危药材肉从蓉的利用率，使其产生更高的经济价值，是巫待解决的关键问题。

中国专利CN102349650A公开了一种提高肉苁蓉有效成分溶出率的方法，该发明主要通过新鲜的肉苁蓉经过快速清洗，然后切分、柠檬酸液浸泡、微波灭酶后，加入淀粉酶和果胶酶进行酶解，然后加入助滤剂，对酶解液进行分离。该专利解决的技术问题是提高出汁率，使出汁率由54%提高到65%，从而提高了肉苁蓉有效成分的溶出率，该专利没有给出本发明肉苁蓉多肽及其制备方法的技术启示。

本专利采用塔克拉玛干沙漠优质肉苁蓉为原料，对其鲜药材进行剥皮处理，所得的肉苁蓉皮进行干燥再采用乙醇进行提取，可以得到传统的化学成分；对果肉采用榨汁机进行榨汁，得到水提取物；对榨汁后所得到的肉苁蓉渣进行烘干处理，粉碎成粉，再经过碱溶酸沉法处理、酶解、超滤纯化，最终得到的分子量为500-10000道尔顿的多肽，并进行治疗癌症及癌症化疗引起的腹泻功效的研究，以及与中国专利CN103585546A公开的中药组合物配伍使用的研究。

目前癌症已成为人类面临的一大杀手，死亡率仅次于心血管疾病，而且呈逐年上升的趋势。肿瘤患者进行化疗，虽然有一定的疗效，但化疗后大部分患者会出现不同程度的副作用，其中化疗药单用或联合用均会引起患者腹泻等毒副反应，肿瘤化疗后腹泻又叫化疗相关性腹泻。近年来随着化疗药物如5- 氟尿嘧啶、紫杉烷类、羟基喜树碱、伊立替康、希罗达等的面世及推广应用，化疗相关性腹泻的发生率逐年提高，而且若不进行积极治疗，易导致患者脱水、营养不良、血清电解质紊乱、酸碱平衡失调等，不仅对机体的康复带来极大的不利，也给周期性化疗带来一定的困难，因此对化疗相关性腹泻的有效治疗已成为肿瘤患者整体治疗的重要组成部分。

目前尚无对抗癌症化疗具有减轻腹泻及增效作用的中成药，中国专利CN103585546A公开的中药组合物在治疗癌症化疗引起的腹泻的作用机理不明确，药效不明显，因此在此中药组合物的辅助下，研发一种高效低毒、价格低廉，易于推广的可用于减轻癌症化疗相关性腹泻并起化疗增效作用的药物组合物显得尤其重要。

发明内容

为了解决现有技术中存在的缺陷，本发明的目的在于提供肉苁蓉多肽提取物、制备方法及其用途。本发明提供的一种从肉苁蓉粉中制备肉苁蓉多肽提取物的方法，包括以下步骤：

（1）往肉苁蓉粉加入NaOH溶液至pH值为8-10，在45-55℃下浸提时间40-60min，然后离心处理，即得肉苁蓉蛋白；

（2）使用步骤（1）得到的肉苁蓉蛋白配置底物浓度5-9%的肉苁蓉蛋白反应体系，调节肉苁蓉蛋白反应体系的pH值至6.0-7.0，控制温度60-70℃，加入酶底比3.0-4.0%的酶解蛋白酶，恒温搅拌酶解，酶解时间为3.0-4.0h，即得酶解液，所述的酶解蛋白酶为碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、果胶酶和淀粉酶中的至少一种；

（3）对步骤（2）得到的酶解液进行12-17min的煮沸灭酶处理，冷却后使用2 mol/L的HCL溶液调至pH值至中性，然后离心除去沉淀，取上清液，上清液含有肉苁蓉蛋白肽；