[发明专利]一种利用热榨花生粕制备葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法在审
申请号: | 201410547450.2 | 申请日: | 2014-10-16 |
公开(公告)号: | CN104342475A | 公开(公告)日: | 2015-02-11 |
发明(设计)人: | 齐宏涛 | 申请(专利权)人: | 青岛博之源生物技术有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 史霞 |
地址: | 266001 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 花生 制备 葡萄 糖苷酶 抑制 活性 方法 | ||
1.一种利用热榨花生粕制备葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法,包括以下步骤:
(1)花生粕粉碎过150目筛,筛下物加入石油醚脱脂,干燥得到脱脂的花生粕粉,加入蒸馏水,微波加热混合均匀,调节pH值,加入复合植物水解酶Viscozyme L,微波辅助酶解,得到Viscozyme L酶解液;
(2)调节Viscozyme L酶解液pH值,加入复合蛋白酶,微波辅助酶解,灭酶,离心;
(3)上清液1加入4倍于其体积的无水乙醇,冰箱中静置过夜,离心,上清液2真空旋转蒸发浓缩,超滤膜分离浓缩,透过液冷冻干燥得到葡萄糖苷酶抑制活性肽。
2.根据权利要求1所述的利用热榨花生粕制备葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(1)所述的花生粕粉碎筛下物与石油醚的质量与体积比为1:8.3-10.2(g/ml),石油醚沸程为30-60℃,脱脂的条件为51℃恒温水浴振荡器中,以325r/min转速往复式振荡脱脂16h,通风橱中挥发干燥,脱脂的花生粕粉与蒸馏水的质量与体积比为1:9.7-10.7(g/ml),微波功率800w、加热温度47.5℃、加热时间3.2min条件下混合均匀,pH值调节至4.8-5.8,Viscozyme L加入量为每克花生粕粉17.5-20.5FBG(FBG为Viscozyme L的酶活单位),微波功率800w、加热温度45.5-52.5℃、加热时间8.5-10.5min条件下酶解。
3.根据权利要求1所述的利用热榨花生粕制备葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(2)所述的pH值调节至7.2-8.2,复合蛋白酶为碱性蛋白酶Alcalase、木瓜蛋白酶、中性蛋白酶Neutral Protease、无花果蛋白酶以2.1:1.8:2.5:2.6比例混合的复合蛋白酶,加入量为每克花生粕粉5000-7000U(U为复合蛋白酶的酶活单位),酶解的条件为微波功率800w、加热温度50-60℃、加热时间4.5-12.5min,100℃灭酶5min,7200r/min离心18min。
4.根据权利要求1所述的利用热榨花生粕制备葡萄糖苷酶抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(3)所述的离心条件为7200r/min离心18min,在水浴加热温度73℃、真空度0.1MPa条件下,以224r/min转速真空旋转蒸发浓缩,Labscale小型切向流超滤系统中以3.45bar压力、25℃、34ml/min进料流速、10kDa的Pellicon XL超滤膜管匣进行一级超滤,再以4.25bar压力、25℃、24ml/min进料流速、5kDa的Pellicon XL超滤膜管匣进行二级超滤分离浓缩,冷冻干燥条件为-55℃、真空度0.1MPa,干燥48h。
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