[发明专利]一种基于流式超连续谱衰荡光谱的血细胞分类系统及方法有效

专利信息
申请号: 201410546748.1 申请日: 2014-10-16
公开(公告)号: CN104330348A 公开(公告)日: 2015-02-04
发明(设计)人: 万雄;王建;刘鹏希;章婷婷;王建宇 申请(专利权)人: 中国科学院上海技术物理研究所
主分类号: G01N15/14 分类号: G01N15/14
代理公司: 上海新天专利代理有限公司 31213 代理人: 郭英
地址: 200083 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 基于 流式超 连续谱 光谱 血细胞 分类 系统 方法
【权利要求书】:

1.一种基于流式超连续谱衰荡光谱的血细胞分类系统,它包括流式细胞分离器(24)、全光纤超连续谱激光器(1)、衰荡光谱组件(26)、超连续谱衰荡光谱信号采集分析部分(25),其特征在于:

所述的流式细胞分离器(24)包括流式装载部件(20)、流速控制器(14)、流动室(21);流动室(21)中含有采样分离稀释溶血组件(19)、血小板通道(16)、白细胞通道(17)、红细胞通道(18)、样品细胞流管(13);

所述的衰荡光谱组件(26)由针孔滤片(3)、100倍显微物镜(5)、衰荡镜片A(6)、衰荡镜片B(9)组成;

所述的超连续谱衰荡光谱信号采集分析部分(25)由光谱分析组件(11)、分析软件(12)、计算机(10)组成;

全血试管通过流式装载部件(20)进行自动装载,进入仪器内部的流动室(21)后,通过采样分离稀释溶血组件(19)进行自动吸管进样,通过自动溶血、稀释、通道分离等操作,形成红细胞通道(18)、白细胞通道(17)、血小板通道(16);选择其中一个通道,通道细胞溶液通过喷嘴(22)进入样品细胞流管(13),形成细胞流,并沿样品细胞流管(13)的中轴线从上至下流动,样品细胞流管(13)沿管壁位置从上至下通辅助液体鞘液(23),通过流速控制器(14)可进行流速控制,通过改变鞘液(23)与细胞流的流速差,从而形成不同直径的细胞流,选择合适的流速差,形成单层单纵列细胞流(8);电阻计数器(15)基于电阻法可对单层单纵列细胞流(8)进行计数;预先设定检测细胞数目值M,启动计数,同时启动全光纤超连续谱激光器(1)、衰荡光谱组件(26)、超连续谱衰荡光谱信号采集分析部分(25),开始对单层单纵列细胞流(8)的每一个单独血细胞进行超连续谱谱段的衰荡光谱信号进行检测与分析。

2.一种基于权利要求1所述基于流式超连续谱衰荡光谱的血细胞分类系统的血细胞分类检测方法,其特征在于方法如下:

全光纤超连续谱激光器(1)其发出的超连续谱脉冲激光光束(2)经过针孔滤片(3),针孔滤片(3)上中心位置针孔(4)的直径与激光光束(2)的光束中心直径近似相等,经100倍显微物镜(5)耦合进入由高反射率衰荡镜片A(6)与衰荡镜片B(9)组成的衰荡腔中,并精确聚焦单层单纵列细胞流(8)的单个血细胞上,其聚焦光束直径与典型血细胞直径相当;当光束穿过单个血细胞后,透射光谱分布与该血细胞的光学性质有关,此外由于吸收其强度减少,经衰荡镜片B(9)的高反射率镜面反射再次穿过血细胞,光强进一步减小,光束再经衰荡镜片A(6)的高反射率镜面反射再次穿过血细胞,从而在衰荡腔内来回振荡,衰荡镜片B(9)后的光谱分析组件(11)进行透过光谱信号的采集,其超连续谱整个谱段对应每个波长的信号的强度随振荡次数的增加而逐渐减少,当采集到的信号强度为初始强度的1/e时对应的时间为该血细胞的衰荡时间,通过光谱分析组件11可得到该血细胞超连续谱整个谱段的时间分辨光谱,通过及分析软件(12)及计算机(10),可对该血细胞进行整个谱段的光谱随时间变化的关系,并计算该血细胞整个谱段对应每个波长的衰荡时间,把这些数据存入计算机(10)中以供后续分析;

流速控制器(14)控制的单个血细胞流过聚焦光束的时间远大于对该血细胞整个谱段的时间分辨光谱的采集及信号处理时间,该血细胞的光谱分析结束后,继续进行下一个血细胞的整个谱段的时间分辨光谱的采集及信号处理,当电阻计数器(15)所计血细胞数目达到预先设定的数值M时,完成整个血细胞流的时间分辨光谱的采集,血细胞流液通过废液处理器(7)处理并排出仪器,计算M个血细胞整个谱段每个波长对应的衰荡时间作为细胞分类特征,用以进行不同动物血细胞的判别。

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