[发明专利]一种双靶向卵巢癌细胞微管蛋白及其周围血管的茚酮化合物及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属生物医学技术领域，具体涉及一种双靶向卵巢癌细胞微管蛋白及其周围血管的茚酮化合物及其制备方法与应用。 

背景技术

茚酮类药物因其独特的药理作用成为抗癌新药研发的热点。近年来，国内外的研究人员从不同角度对茚酮类化合物临床前应用、抗癌机制等方面进行研究，发现茚酮类化合物对多种癌细胞具有显著的疗效。 

天然存在的茚酮化合物有100多个，其基本结构有1-茚酮、2-茚酮、1，2-茚二酮、1，3-茚二酮、茚三酮。这些茚环结构存在于天然产物、合成药物、农药等分子中。茚酮本来是一种有机发光物质合成的原料，具有很强的工业应用前景。而在肿瘤治疗方面，Indanocine及其衍生物也已被发现具有广谱而高效的抗癌活性，对于多种临床恶性肿瘤疗效显著，并且对普通抗癌药物耐药的晚期肿瘤有良好的疗效。具有开发成抗耐药性恶性疾病药物的良好前景。 

目前认为茚酮类化合物抗肿瘤主要通过调控微管动力学稳定机制。它的靶位点是微管蛋白/微管系统，能促进微管聚合，抑制微管降解，使细胞分裂阻滞。当然也有许多其他信号传导通路和机制参与茚酮类化合物对抗肿瘤细胞生长。茚酮类化合物对微管的这种结合是呈依赖性、可逆性和浓度依赖性的。即茚酮类化合物与微管蛋白的特定位点可逆地结合，使其动态平衡向着装配的方向移动，增加微管聚合的速率和产量。 

一方面，茚酮类微管蛋白抑制剂具有强大的抗有丝分裂的作用，能够抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡。另一方面，这类微管蛋白抑制剂的水溶性较差，难以经血管给药；仅仅对抗肿瘤细胞本身的增殖，抗肿瘤谱很窄，且治疗过程中的耐药发生率高。所以针对一些已经发现的茚酮类微管蛋白抑制剂进行深入的结构修饰与改造，以期获得抗肿瘤活性更好、对多药耐药肿瘤细胞有效的化合物将成为研究与开发该类药物的一个新方向。 

近年来有研究发现，带有特定基团的茚酮类化合物可以通过抑制人血管内皮因子生长的活性，对肿瘤血管生成起负调节作用。其中一类代表性化合物——氮代茚酮类化合物是从链霉菌中分离的天然产物，不仅具有良好的抗肿瘤活性，而且对体外培养的血管内皮细胞有强烈的抑制作用。这表明除了抑制肿瘤细胞微管蛋白之外，茚酮类化合物还具备抑制肿瘤血管生成的潜能。因此，经过特定基团修饰后的茚酮类化合物将具备单药双靶向特性，即同时靶向肿瘤细胞本身和靶向为肿瘤细胞提供营养物质的血管，这将为肿瘤治疗的研究开辟出一片新领域。因此需要通过进一步的构象研究，设计合成新型双靶向微管抑制剂，得到活性更强、毒性更低、对多药耐药肿瘤细胞更有效的茚酮类化合物。 

本发明在前期实验中发现茚酮类化合物在体外可以抑制耐药和/或不耐药卵巢癌细胞的增殖，并能诱导耐药和/或不耐药卵巢癌细胞凋亡，初步证实其具有较为良好的抗肿瘤活性。而后，我们进一步应用SKOV3卵巢癌细胞系对其体内外抗癌活性进行了再次确认，同时与已应用于临床的抗癌药物顺铂进行了药效比较；然后分别从微管蛋白抑制方面及肿瘤血管生成抑制方面探讨了茚酮类化合物对抗卵巢癌的具体作用机制；最后，应用急慢性毒性试验来初步评估茚酮类化合物的毒性，为开发高效、安全的双靶向茚酮类抗肿瘤药物提供了实验基础。 

发明内容

本发明目的在于提供一种双靶向卵巢癌细胞微管蛋白及其周围血管的茚酮化合物及其制备方法与应用。 

本发明提供的双靶向卵巢癌细胞微管蛋白及其周围血管的茚酮化合物1，其结构式为： 

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本发明提供的茚酮化合物1的合成路线为： 

具体合成步骤如下：

首先，1-(2-炔基苯基)-2-烯基酮与异氰基乙酸乙酯环化生成中间体二氢吡咯类化合物，然后，该中间体在AgOTf（三氟甲磺酸银）的作用下发生炔烃的水解，随后发生分子内的Aldol缩合，生成茚酮骨架；最后，在氧气作用下氧化芳构化，得到目标化合物。

合成方法的具体操作步骤为： 

在试管中依次加入1-(2-炔基苯基)-2-烯基酮（0.2-20 mmol），AgOTf（三氟甲磺酸银）（0.10-0.12当量），碳酸铯（2.0-2.5当量），异氰基乙酸乙酯（1.2-1.3当量）以及1-100 mL乙腈，上述混合物在封闭的体系下加热至105-110℃反应2-3小时，快速柱层析分离，即得到目标化合物。