[发明专利]一种光叶菝葜组织培养的快速繁殖方法

权利要求书

1.一种光叶菝葜组织培养的快速繁殖方法，包括光叶菝葜无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根诱导、炼苗移栽，其主要步骤如下：

（1）取光叶菝葜幼嫩的叶片，对其进行消毒处理；

（2）取步骤（1）消毒处理过的光叶菝葜幼嫩叶片接入ER+IBA0.8mg/L+ZT3mg/L+S-33070.3-0.5mg/L+0.7%琼脂+30g/L蔗糖的培养基中进行愈伤组织的诱导，pH5.85，暗光照培养，温度26±2℃；

（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入培养基ER+IBA0.5mg/L+ZT0.8mg/L+0.02mg/LTDZ进行愈伤组织分化培养，附加蔗糖30g/L，琼脂7g/L，pH5.85，光照2700lx，温度26±2℃；

（4）取步骤（3）分化出来的芽苗接入1/4MS+ S-33070.7-0.9mg/L培养基中进行生根诱导，附加蔗糖25g/L，琼脂7g/L，pH5.85，光强10000lx，光照时间16h/d，温度26±2℃；

（5）取步骤（4）的试管苗进行炼苗移栽。

2.按照权利要求1所述的一种光叶菝葜组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述光叶菝葜无菌叶片的获得为，取光叶菝葜幼嫩的叶片，流水冲洗15min，超净工作台上次氯酸钠消毒处理9min，无菌水冲洗5次。

3.按照权利要求1所述的一种光叶菝葜组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述消毒处理过的光叶菝葜幼嫩叶片先放入-1℃的冰箱中进行低温预处理，可以提高出愈率。

4. 按照权利要求1所述的一种光叶菝葜组织培养的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（5）中光叶菝葜炼苗移栽的方法为待试管苗长约5cm，根长约2cm时，放入高压灭菌过的沙壤土铺设的基质中，用双层黑色遮荫网覆盖，定时浇水除草，每隔10天喷施3000倍的水合霉素，温度控制在28℃，湿度90%，一个月后统计成活率。