[发明专利]一种建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法有效
| 申请号: | 201410539648.6 | 申请日: | 2014-10-11 |
| 公开(公告)号: | CN104285906A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
| 发明(设计)人: | 杨义婷;郭建洋;万方浩;刘万学;刘怀 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院植物保护研究所 |
| 主分类号: | A01K67/033 | 分类号: | A01K67/033 |
| 代理公司: | 北京法思腾知识产权代理有限公司 11318 | 代理人: | 高宇 |
| 地址: | 100093 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 建立 含有 rickettisa 烟粉虱 种群 方法 | ||
1.一种建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:
(1)采集烟粉虱种群,在实验室培养,其中光照条件为白天14h:黑夜10h,相对湿度为75%~85%;
(2)待种群量相对较大时,选取出若干烟粉虱于显微镜下观察辨别雌雄;
(3)取已长出两片真叶的甜瓜苗,用养虫笼夹在甜瓜苗的叶片上,吸取雌雄烟粉虱各一头,接于甜瓜叶片的背面;
(4)3-4天过后,将养虫笼的烟粉虱取出,将甜瓜在以下条件下培养,光照条件为白天14h:黑夜10h,相对湿度为75%~85%;
(5)提取单头烟粉虱的DNA,然后利用PCR方法对其DNA进行分子鉴定,所用引物如以下,利用烟粉虱内共生菌鉴定引物,鉴定种群内共生菌情况,
引物序列(5′→3′)
F:CGCTTCAGCAATTACCGT
R:GAACTACTACACCTCCAA
;
(6)待烟粉虱羽化后,取同一养虫笼里的雌雄烟粉虱,重复(3)~(5)步骤;
(7)纯化至得到稳定的种群。
2.根据权利要求1所述的建立含有Rickettisa菌和不含Rickettisa菌的烟粉虱种群的方法,其特征在于,经过连续单头饲养并纯化5代,即可以得到稳定的含菌种群和无菌种群。
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