[发明专利]马齿苋药材的质量控制方法

说明书

技术领域

本发明涉及马齿苋药材的质量控制方法。

背景技术

马齿苋(拉丁学名：Portulaca oleracea L.)为马齿苋科一年生草本植物。肥厚多汁，无毛，高10～30cm，生于田野路边及庭园废墟等向阳处。国内各地均有分布。该种为药食两用植物。全草供药用，有清热利湿、解毒消肿、消炎、止渴、利尿作用；种子明目。

马齿苋中含有脂肪酸、萜类、生物碱、香豆素、黄酮、酚酸和挥发油等多种化学成分。现代研究表明，马齿苋具有抗菌、消炎止痛、松弛肌肉、治外伤和神经保护作用，以及显著的抗氧化和延缓衰老作用。

当前对马齿苋药材的质量控制中，多以黄酮类成分为其指标成分。然而，发明人在对现有技术的研究中发现，目前已经从马齿苋中分离得到了马齿苋酰胺A～E、N-反式阿魏酰基酪胺等，同时也分离得到了阿魏酸等酚酸类化合物。马齿苋酰胺结构中含有一个或两个酚羟基，酚羟基的氢原子可被自由基捕获，具有一定的抗氧化活性，同时，马齿苋酰胺A～D为对羟基肉桂酸和阿魏酸的衍生物，有报道表明，对羟基肉桂酸和阿魏酸等可清除超氧自由基，降低MDA含量，具有很强的抗氧化活性(杨子娟，马齿苋的化学成分及抗氧化活性研究，吉林农业大学，2008年.第2、3、5、13页)。马齿苋的生物碱成分——马齿苋酰胺B、D和N-反式阿魏酰基酪胺为阿魏酸衍生物，水解后有阿魏酸生成。

对阿魏酸的研究表明，该化合物具有光谱抑菌作用，抗氧化，神经保护，抗血小板聚集，抑制血小板5-羟色胺释放，抑制血小板血栓素A2(TXA2)的生成，增强前列腺素活性，镇痛，缓解血管痉挛等作用。由此可见，阿魏酸的药效活性与马齿苋药材的活性具有较高的一致性。

因此，鉴于上述结构和药效活性特点，发明人认为，阿魏酸以及具有阿魏酸结构的生物碱衍生物，对马齿苋药材的功效有着重要贡献，若能够对马齿苋药材中的阿魏酸及其衍生物进行检测，将能够更为有效地控制马齿苋药材的质量。

发明内容

由现有技术可知，马齿苋生物碱具有一定的生物活性，如抗氧化作用，马齿苋酰胺B、D和N-反式阿魏酰基酪胺也均为阿魏酸衍生物，水解后有阿魏酸生成；而马齿苋药材中含有的游离阿魏酸，也同样是马齿苋药材中的重要活性成分。因此，测定马齿苋药材中阿魏酸的含量，就能够有效检测出马齿苋中具有生理活性的阿魏酸及其衍生物的总量，从而实现对马齿苋药材质量的控制。

具体地，本发明提供了马齿苋药材的质量控制方法，它包括如下操作步骤：

(1)供试品溶液的制备：

取马齿苋，粉碎，精密称定，加水提取，合并提取液，上大孔吸附树脂柱，依次用水、70％v/v乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇后，加强酸水解后，用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯萃取层，除去溶剂，干燥，溶解后过滤，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备：以阿魏酸为对照品，溶解后即得对照品溶液；

(3)分别将供试品溶液和对照品溶液注入液相色谱仪中，采用外标法计算马齿苋中阿魏酸含量即可；色谱条件如下：

色谱柱：C18色谱柱；检测波长：316nm；流动相：甲醇-1.0％v/v冰醋酸溶液＝20：80v/v。

本发明研究表明，只有在上述流动相条件下，才能够很好地将阿魏酸主峰和杂峰分离，分离度大于1.5，保证了含量测定的精确度和重现性。

进一步地，所述大孔吸附树脂为D101、HPD450或H103。

更进一步地，所述大孔吸附树脂为D101。

进一步地，加强酸水解时间为15min～120min。

更进一步地，加强酸水解时间为30min。

其中，本发明所述强酸选自盐酸、硫酸或磷酸。其中，盐酸的终浓度为1％～5％w/v(g/ml)。当然，也可以根据常规计算方式换算成硫酸或磷酸的终浓度。

所述终浓度，即强酸加入到浓缩液后，按照整个液体体积计算的强酸浓度。

其中，流动相流速：1.0ml/min。

其中，色谱柱温：30℃。

其中，步骤(1)中供试品溶液的溶剂为流动相。

其中，步骤(2)中对照品溶液的溶剂为70％甲醇溶液。

马齿苋药材化学组成复杂多样，阿魏酸是其有效成分之一，本发明选取阿魏酸作为质量控制的指标成分。本发明通过对药材前处理方法、色谱条件等的筛查，最终实现了对马齿苋药材阿魏酸稳定可行的检测。