[发明专利]独一味的HPLC检测方法及指纹图谱检测技术

权利要求书

1.独一味的HPLC检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

(1)取待检药材，以甲醇或含水甲醇提取，制备供试品溶液；

(2)将供试品溶液注入高效液相色谱仪中，检测即可，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基键合硅胶为填料

检测波长：235nm±5nm

流动相：A：乙腈，B：0.1～0.5％磷酸水溶液，梯度洗脱程序为：0～10min，5％～8％A；10～27min，8％～12％A；27～35min，12％～12％A；35～70min，12％～17％A；70～80min，17％～19％A；80～110min，19％～36％A；110～120min，36％～50％A。

2.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤(1)中，所述含水甲醇中甲醇浓度为65～75％v/v，优选为70％v/v。

3.根据权利要求1或2所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤(1)中，提取的方法选自回流、超声、浸渍或渗漉。

4.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：步骤(2)中，磷酸水溶液浓度为0.1％～0.3％，优选为0.1％。

5.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：所述色谱柱的尺寸为4.6mm×250mm，5μm。

6.根据权利要求1或5所述的HPLC检测方法，其特征在于：色谱柱柱温为30±2℃。

7.根据权利要求1所述的HPLC检测方法，其特征在于：所述检测方法中，选用胡麻属苷、山栀苷甲酯、绿原酸、马钱苷、8-O-乙酰山栀苷甲酯、连翘酯苷B、木犀草苷、麦角甾苷中的一种或两种以上的组合物为对照品。

8.独一味的HPLC指纹图谱检测方法，其特征在于：它包括如下操作步骤：

(1)取待检药材，以甲醇或含水甲醇提取，制备供试品溶液；

(2)将供试品溶液注入高效液相色谱仪中，检测即得供试品指纹图谱，色谱条件如下：

色谱柱：十八烷基键合硅胶为填料

检测波长：235nm±5nm

流动相：A：乙腈，B：0.1～0.5％磷酸水溶液，梯度洗脱程序为：0～10min，5％～8％A；10～27min，8％～12％A；27～35min，12％～12％A；35～70min，12％～17％A；70～80min，17％～19％A；80～110min，19％～36％A；110～120min，36％～50％A；

(3)将供试品指纹图谱与对照指纹图谱比较，各共有峰保留时间相似度在0.9以上的药材即为独一味；其中，对照指纹图谱中，共有峰14个，以山栀苷甲酯为参照峰，各共有峰相对保留时间如下：0.65、0.68、0.77、1、1.20、1.26、1.50、1.58、2.44、3.16、3.28、3.39、3.72、4.13。