[发明专利]基因沉默治疗剂的脂质体有效递送方法和组合物

权利要求书

1.一种制备包含活性剂的组合物的方法，所述方法包括：

a)提供第一流体，所述第一流体包含活性剂的含水缓冲溶液，所述活性剂选自基因沉默剂、基因调节剂、反义试剂、肽核酸试剂、核酶试剂、RNA试剂、DNA试剂和药物化合物；

b)提供第二流体，所述第二流体包含处于有机溶剂中的一种或多种脂质体形成化合物的非水溶液，所述有机溶剂易于与水、烷醇、烷醇-水、乙腈、丙酮、酮类、二甲基亚砜、二甲基甲酰胺、表面活性剂溶液、去污剂溶液及它们的混合物混合；其中所述脂质体形成化合物包括胆固醇琥珀酸单酯(CHEMS)和一种或多种非阳离子脂质化合物；

c)使所述第一流体与所述第二流体撞击，由此形成所述有机溶剂浓度为20％至50％v/v且pH为6至7.4的撞击流体；

d)在收集容器中于20℃至35℃的温度下温育所述撞击流体0.5小时至8小时，由此形成含有脂质体的温育物，

其中所述第一流体的体积流率是所述第二流体的体积流率的两倍或更高。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述一种或多种非阳离子脂质化合物选自1,2-二月桂酰-sn-甘油(DLG)；1,2二肉豆蔻酰-sn-甘油(DMG)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油(DPG)；1,2二硬脂酰-sn-甘油(DSG)；1,2-二月桂酰-sn-甘油基-3-磷脂酸(钠盐；DLPA)；1,2二肉豆蔻酰-sn-甘油基-3-磷脂酸(钠盐；DMPA)；1,2二棕榈酰-sn-甘油基-3-磷脂酸(钠盐；DPPA)；1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷脂酸(钠盐；DSPA)；1,2-二花生酰-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DAPC)；1,2二月桂酰-sn-甘油基-3-磷酸胆碱(DLPC)；1,2二肉豆蔻酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(DMPC)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油基-0-乙基-3-胆碱磷酸(氯化物或三氟甲磺酸盐；DPePC)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(DPPC)；1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(DSPC)；1,2二月桂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DLPE)；1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DMPE)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DPPE)；1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺(DSPE)；1,2-二月桂酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；DLPG)；1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；DMPG)；1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油基-3-磷酸-sn-1-甘油(铵盐；DMP-sn-1-G)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；DPPG)；1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；DSPG)；1,2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸-sn-1-甘油(钠盐；DSP-sn-1-G)；1,2-二棕榈酰-sn-甘油基-3-磷酸-L-丝氨酸(钠盐；DPPS)；1-棕榈酰-2-亚油酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(PLinoPC)；1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(POPC)；1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；POPG)；1-棕榈酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(钠盐；POPG)；1棕榈酰-2-油酰-sn-甘油基-3-磷酸甘油(铵盐；POPG)；1-棕榈酰-2-4o-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(P-lyso-PC)；1-硬脂酰-2-lyso-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(S-lyso-PC)；二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二植烷酰磷脂酰乙醇胺(DPhPE)、1,2-二油酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(DOPC)和1,2-二植烷酰-sn-甘油基-3-胆碱磷酸(DPhPC)，和胆固醇。

3.如权利要求1所述的方法，其中所述烷醇是指C1-C6烷醇。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述C1-C6烷醇选自乙醇、异丙醇、异丁醇、仲丁醇、叔丁醇。

5.如权利要求1所述的方法，其中烷醇-水是指乙醇-水。

6.如权利要求1所述的方法，其进一步包括通过向所述温育物中加入足以使所述有机溶剂的浓度小于20％v/v的缓冲剂而使所述温育物淬火。

7.如权利要求1所述的方法，其进一步包括使所述第一流体的体积流率是所述第二流体的体积流率的三倍或更高。