[发明专利]基因组被修饰的细胞

权利要求书

1.一种含有在Fc区具有N-糖苷连接糖链的抗体分子的抗体组合物,其特征在于具有岩藻糖不与和抗体组合物Fc区结合的N–糖苷连接的糖链总复合体的还原端的N-乙酰氨基葡萄糖连接的糖链。

2.权利要求1所述的抗体组合物,其特征在于所述不连接岩藻糖的糖链是岩藻糖的1位不与N–糖苷连接的糖链复合体的还原端的N-乙酰氨基葡萄糖的6位通过α-键连接的糖链。

3.权利要求1所述的抗体组合物，其特征在于所述抗体组合物通过下列方法产生：所述方法包括使用含有编码抗体分子的基因的细胞，其中细胞的基因组被修饰以使αl,6-岩藻糖基转移酶的活性比其亲代细胞更低或消失，其中编码αl,6-岩藻糖基转移酶的基因组上的所有等位基因被敲除，并且所述的α1,6-岩藻糖基转移酶是选自以下(a)或(b)的蛋白质：

(a)由SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列组成的DNA编码的蛋白质；和

(b)由SEQ ID NO:4所示氨基酸序列组成的蛋白质。

4.权利要求3所述的抗体组合物，其特征在于所述细胞对识别糖链的凝集素具有抗性，所述糖链中岩藻糖的1位与N-糖苷连接的糖链复合体中还原端的N-乙酰氨基葡萄糖的6位通过α-键连接。

5.权利要求4所述的抗体组合物,其特征在于所述细胞对选自以下(a)至(d)的至少一种凝集素具有抗性：

(a)小扁豆凝集素；

(b)豌豆凝集素；

(c)蚕豆凝集素；

(d)陈皮木耳凝集素。

6.权利要求3所述的抗体组合物,其特征在于所述细胞选自以下(a)至(j)：

(a)来源于中国仓鼠卵巢组织的CHO细胞；

(b)大鼠骨髓瘤细胞系YB2/3HL.P2.G11.16Ag.20细胞；

(c)小鼠骨髓瘤细胞系NS0细胞；

(d)小鼠骨髓瘤细胞系SP2/0-Ag14细胞；

(e)来源于叙利亚仓鼠肾组织的BHK细胞；

(f)产生抗体的杂交瘤细胞；

(g)人白血病细胞系Namalwa细胞；

(h)非人胚胎干细胞；

(i)非人受精卵细胞；

(j)植物细胞。

7.权利要求1所述的抗体组合物，其特征在于所述抗体分子选自以下的(a)至(d)：

(a)人抗体；

(b)人源化抗体；

(c)含(a)或(b)Fc区的抗体片段；

(d)含(a)或(b)Fc区的融合蛋白质。

8.权利要求1所述的抗体组合物，其特征在于所述抗体分子属于IgG型。

9.权利要求3所述的抗体组合物，其特征在于所述抗体组合物是比其亲代细胞产生的抗体组合物具有更高抗体依赖性细胞介导细胞毒活性的抗体组合物。

10.权利要求9所述的抗体组合物,其特征在于所述具有更高抗体依赖性细胞介导细胞毒活性的抗体组合物比其亲代细胞产生的抗体组合物具有更高的糖链比例。

11.权利要求9所述的抗体组合物，其特征在于所述具有更高抗体依赖性细胞介导细胞毒活性的抗体组合物是与抗体组合物Fc区结合的N–糖苷连接的糖链总复合体中，岩藻糖不与还原端的N-乙酰氨基葡萄糖通过α-键连接的糖链比例是抗体组合物中与Fc区结合的N-糖苷连接糖链总复合体的20％以上。

12.权利要求9所述的抗体组合物，其特征在于所述具有更高抗体依赖性细胞介导细胞毒活性的抗体组合物是没有岩藻糖与糖链中还原端N-乙酰氨基葡萄糖连接的抗体组合物。

13.权利要求1至12任一项所述的抗体组合物作为活性成分的药物。

14.权利要求13所述的药物，其特征在于所述药物是以下疾病的诊断剂、预防剂或治疗剂：肿瘤相关疾病、变态反应相关疾病、炎症相关疾病、自身免疫性疾病、心血管疾病、病毒感染相关疾病或细菌感染相关疾病。

15.权利要求1至12任一项所述的抗体组合物在生产权利要求13或14所述的药物中的应用。