[发明专利]区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法及应用

权利要求书

1.区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，包括以下工艺步骤：

（1）圆头蒿多糖溶液的制备：将圆头蒿多糖充分溶解于无水N,N-二甲基甲酰胺中，得到圆头蒿多糖溶液；

（2）圆头蒿多糖伯羟基的保护：将三苯基氯甲烷溶解于吡啶后加入到上述圆头蒿多糖溶液中，于60℃~80℃反应12~24h；反应结束降至室温，依次用蒸馏水、无水乙醇洗涤后，于0.06~0.08MPa下抽滤，滤饼干燥后，得到伯羟基保护的圆头蒿多糖；

（3）伯羟基保护的圆头蒿多糖的磷酸化：将伯羟基保护的圆头蒿多糖溶于无水N,N-二甲基甲酰胺，加入磷酸化试剂，N₂保护下，于40~60℃反应1~3小时，冷却至0~5℃，用碱液中和至pH=7~8；于室温、0.06~0.08MPa下抽滤；滤液装入截流量为8000~12000道尔顿的透析袋中，先于流水中透析36~72小时，再于去离子中透析18~36小时；然后将透析袋内液体减压浓缩至原体积的1/20~1/40；用乙醇进行沉淀，离心，固体冷冻干燥，得磷酸化伯羟基保护的圆头蒿多糖；

（4）圆头蒿多糖保护基的脱除：将磷酸化伯羟基保护的圆头蒿多糖加入到二氯乙酸中，在室温下搅拌反应30~60min，用无水乙醇沉淀后离心；固体冷冻干燥，得区域选择性取代的圆头蒿多糖磷酸酯。

2.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（2）中，三苯基氯甲烷与吡啶的重量体积比为0.3~0.6 g/mL；三苯基氯甲烷与圆头蒿多糖的质量比为1:0.28~1:0.55。

3.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）中，磷酸化试剂是由以下工艺制备而成：在0~5℃下，将三氯氧磷滴加到吡啶中反应20～30min即得磷酸化试剂；三氯氧磷与吡啶的体积比为1:10~1:15。

4.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述三氯氧磷与伯羟基保护的圆头蒿多糖的体积质量比1:0.2~1:0.4 mg/mL。

5.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）中，减压浓缩是在50~60℃、0.06~0.08MPa下进行。

6.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）中，用乙醇进行沉淀时，乙醇含量占总体积的75~80%。

7.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（4）中，磷酸化伯羟基保护的圆头蒿多糖与二氯乙酸的重量体积比为0.01~0.03 g/mL；无水乙醇的用量为二氯乙酸体积的2~6倍。

8.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）、（4）中，离心是在3500~4500转/分钟下离心10~15分钟。

9.如权利要求1所述区域选择性合成圆头蒿多糖磷酸酯的方法，其特征在于：步骤（3）、（4）中，冷冻干燥是在-60~-50℃、1~5Pa的条件下冷冻干燥30~36小时。

10.如权利要求1所述方法合成的圆头蒿多糖磷酸酯作为HepG2肝癌细胞的抑制剂应用在抗癌药物的制备中。