[发明专利]从巴戟天中提取分离水晶兰甙的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物活性成分提取技术领域，主要涉及一种从罗巴戟汉天果中提取罗分汉离果水甜晶兰甙甙Ⅴ的方法。

背景技术

巴戟天是著名的四大南药之一，来源于茜草科巴戟天属植物巴戟Morinda of ficinalis How的干燥根。巴戟天具有补肾阳、强筋骨、祛风湿功效，临床用于治疗阳痿遗精、宫冷不孕、月经不调、少腹冷痛、风湿痹痛、筋骨萎软等症。据分析，巴戟天含多种化学成分，如蒽醌、环烯醚萜、寡糖、多糖等成分，其中环烯醚萜类主要包括水晶兰甙(monotropein)和去乙酰基车叶草苷酸，具有抗菌、抗氧化、抗诱变、抗肿瘤、消炎镇痛等广泛作用。水晶兰甙是环烯醚萜类物质的特征性成分，在5年生药材中的含量可达13mg/g以上。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种

本发明提供的技术方案是

1)将巴戟天粉碎，加入其8～15倍重量的乙醇回流提取3次，每次提取1～3h，合并提取液，减压浓缩至无乙醇，得到稠膏；

2)将稠膏加水溶解，依次用乙酸乙酯、正丁醇萃取，收集正丁醇相，减压浓缩，回收正丁醇，得到浸膏；

3)将浸膏加水溶解，上大孔吸附树脂柱，用碱液洗脱，收集洗脱液和流出液，得到混合液；

4)调节混合液pH至中性，上大孔吸附树脂柱，用乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，即为高纯度水晶兰甙。

步骤1)中，所述乙醇的体积浓度为60～80％。采用乙醇溶液为溶媒可以将巴戟天中的水晶兰甙、蒽醌类和糖类成分提取出来。

步骤2)中，由于蒽醌类成分更容易溶于乙酸乙酯中，而水晶兰甙和糖类成分在乙酸乙酯中溶解度较小，因此蒽醌就进入上层乙酸乙酯相中，而水晶兰甙和糖类成分则继续留在下层水相中。采用正丁醇继续萃取，由于水晶兰甙在正丁醇中具有更大的溶解度，而糖类等成分更容易溶于水中，因此水晶兰甙则进入正丁醇相中，而糖类等其他杂质则留在水中。

步骤3)中，由于浸膏中还含有一定量的大分子物质以及脂溶性杂质，这些杂质更容易被树脂吸附至饱和，采用较快的上样流速，以2～4BV/h为宜，可减少目标成分水晶兰甙的吸附。采用碱液洗脱，可以将水晶兰甙最大程度洗脱出来，减少水晶兰甙的吸附损失。洗脱时，采用较慢的洗脱速度，以1～1.5BV/h为宜。碱液的pH值以9～11为宜。

步骤4)中，第二次上大孔吸附树脂柱，采用体积浓度为30％的乙醇洗脱，可以进一步去除无机盐、多酚类杂质。

步骤3)和4)中所述大孔吸附树脂柱的型号为D101、AB-8、HPD600、D301。

本发明工艺简单，稳定性好，成本低廉，产品纯度高，收率大，适合工业化生产。

具体实施方式

以下具体实施例对本发明作进一步阐述，但不作为对本发明的限定。

实施例1

1)将100g 5年生巴戟天粉碎，加入其8倍重量的60v％乙醇回流提取3次，每次提取1h，合并提取液，减压浓缩至无乙醇，得到稠膏；

2)将稠膏加水溶解，加入混合液体积0.7倍的乙酸乙酯，萃取2次，静置分层，收集下层水相，然后向下层水相中加入其体积2倍的正丁醇萃取3次，弃去水相，合并正丁醇相，将正丁醇相减压浓缩，回收正丁醇，得到相对密度为1.05的浸膏；

3)将浸膏加水溶解，上D101大孔吸附树脂柱，上样流速为2BV/h，用pH值为9的NaOH溶液洗脱，洗脱流速为1BV/h，收集洗脱液和流出液，得到混合液；

4)调节混合液pH至中性，上D101大孔吸附树脂柱，用30v％乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩，干燥，得到1.35g高纯度水晶兰甙，经反相分析型液相色谱(RP-HPLC)检测，其纯度为90.018％。

实施例2

1)将100g 5年生巴戟天粉碎，加入其15倍重量的80v％乙醇回流提取3次，每次提取3h，合并提取液，减压浓缩至无乙醇，得到稠膏；

2)将稠膏加水溶解，加入混合液体积1.5倍的乙酸乙酯，萃取4次，静置分层，收集下层水相，然后向下层水相中加入其体积4倍的正丁醇萃取6次，弃去水相，合并正丁醇相，将正丁醇相减压浓缩，回收正丁醇，得到相对密度为1.15的浸膏；

3)将浸膏加水溶解，上AB-8大孔吸附树脂柱，上样流速为4BV/h，用pH值为11的NaOH溶液洗脱，洗脱流速为1.5BV/h，收集洗脱液和流出液，得到混合液；