[发明专利]从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法

权利要求书

1.一种从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)将叉子圆柏粉碎成粗粉，以乙醇水溶液进行提取，得到的提取液浓缩后，冷冻干燥得到乙醇提取浸膏；

(2)以溶剂A、溶剂B、溶剂C和溶剂D组成高速逆流溶剂系统，将所述高速逆流溶剂系统充分混合后静置，按上下两相分开，取上相为固定相，取下相为流动相；

其中，溶剂A为卤代烷烃或脂肪烷烃；

溶剂B为脂肪酸酯；

溶剂C为脂肪醇；

溶剂D为水或者脂肪酸的水溶液；

(3)将步骤(2)得到的固定相用气压方式压入并充满高效逆流色谱仪的主机工作鼓，开启逆流色谱仪，使主机转动，用流量泵泵入步骤(2)得到的流动相，取步骤(1)得到的乙醇提取浸膏溶解于流动相中进样，分别收集鬼臼毒素的洗脱液和脱氧鬼臼毒素的洗脱液，浓缩后得到所述的鬼臼毒素和所述的脱氧鬼臼毒素。

2.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的卤代烷烃为二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1，1-二氯乙烷、1，2-二氯乙烷中的至少一种。

3.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的脂肪烷烃为正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛烷、石油醚中的至少一种。

4.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的脂肪酸酯为乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯、丙酸甲酯、丙酸乙酯中的一种或任意两种等容积的混合物。

5.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的脂肪醇是甲醇、乙醇、异丙醇、正丁醇中的任一种。

6.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的溶剂A、溶剂B和溶剂C的容积比为1.0：0.3～2.0：0.8～1.5。

7.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，所述的溶剂A为四氯化碳、正己烷或者石油醚；

所述的溶剂B为乙酸乙酯；

所述的溶剂C为甲醇；

所述的溶剂D为水或醋酸水溶液；其中，醋酸水溶液中乙酸的浓度范围为0.01～0.10mol/L。

8.根据权利要求1所述的从叉子圆柏中同时制备高纯度鬼臼毒素和脱氧鬼臼毒素的方法，其特征在于，步骤(3)中，主机转速为400～800rpm；

流动相的流量为3～5mL/min。