[发明专利]一种生产(2R,3S)含碘甲基丙酸甲酯的生物还原法在审
| 申请号: | 201410518180.2 | 申请日: | 2014-10-01 |
| 公开(公告)号: | CN104313066A | 公开(公告)日: | 2015-01-28 |
| 发明(设计)人: | 刘均洪;曹延俊;刘慧;张银;隋洪南 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
| 主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12R1/73 |
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| 地址: | 266061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 生产 甲基 丙酸 生物 还原法 | ||
1.一种耶氏解脂假丝酵母细胞生物还原制备(?)-(2R,3S)-3-(4-碘苯基)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯的方法,其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液,装料系数为0.6-0.7,pH为7.8,加入吸附了底物的白土,使底物2-(4-氟苯甲酰)-2-丙烯酸甲酯添加量为80-90 g/L,麦芽浸膏22-26 g,葡萄糖18-22 g/L,木糖12-13 g/L,山梨坦单月桂酸酯为20-22g/L,121℃高压灭菌30分钟;冷却至32-33℃时,加入湿酵母细胞使浓度为29-32g/L,通气比为0.13-0.16V/(V分钟),进行生物还原反应,反应时间为95-100小时;反应结束后,分别滤出细胞、白土,用乙酸乙酯萃取反应液、萃取白土,合并乙酸乙酯萃取液和萃取白土的乙酸乙酯,蒸出乙酸乙酯,得到产物(?)-(2R,3S)-3-(4-氟苯基)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯,反应转化率94-96%,产品收率92-94%,对映体过量率97-98%。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于湿酵母细胞制备过程如下:耶氏解脂假丝酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液;发酵罐加入培养液,装料系数为0.6-0.7,121℃高压灭菌30分钟,冷却至28-29℃,将耶氏解脂假丝酵母种子液接种至发酵罐,接种比例为6-6.5%,通气比为0.5-1V/(V分钟),28-29℃培养42-48小时,用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞,用作生物还原反应催化剂。
3.权利要求1所述的方法,其特征在培养液成份为:葡萄糖20-25 g/L, 酵母浸膏10-15 g/L, KH2PO4 4.4-5.5 g/L, MgSO4 7H2O 0.5-0.6 g/L,玉米油5-7 g/L, 黄豆粉16-20 g/L, pH值为7.8。
4.权利要求1所述的方法,其特征在于所述吸附了底物的白土制作方法为,将底物溶于乙酸乙酯,底物与乙酸乙酯的比率为0.5:2,得到底物的乙酸乙酯溶液,用白土吸收此溶液,然后,烘干、回收乙酸乙酯,即得到吸附底物的白土,调节底物与白土用量,使得底物与白土的质量比率为0.29-0.33。
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