[发明专利]一种产朊酵母还原生产碘苯基丙酸甲酯的方法在审
| 申请号: | 201410518174.7 | 申请日: | 2014-10-01 |
| 公开(公告)号: | CN104263767A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
| 发明(设计)人: | 张媛媛;梁方方;张银;刘慧;王美玲;隋洪南;刘均洪 | 申请(专利权)人: | 青岛科技大学 |
| 主分类号: | C12P7/62 | 分类号: | C12P7/62;C12R1/72 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 266061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 酵母 还原 生产 苯基 丙酸 方法 | ||
1.一种产朊假丝酵母细胞生物还原制备(?)-(2S,3S)-3-(4-碘苯基)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯的方法,其特征在于反应罐中加入磷酸盐缓冲液,装料系数为0.6-0.7,pH为6.2,加入吸附了底物的硅藻土,使底物2-(4-氟苯甲酰)-2-丙烯酸甲酯添加量为80-90 g/L,麦芽浸膏22-26 g,木糖12-13 g/L,直链的10碳醇聚氧乙烯醚为16-18g/L,121℃高压灭菌30分钟;冷却至30-31℃时,加入湿酵母细胞使浓度为29-32g/L,通气比为0.17-0.2V/(V分钟),进行生物还原反应,反应时间为81-86小时;反应结束后,分别滤出细胞、硅藻土,用乙酸乙酯萃取反应液、萃取硅藻土,合并乙酸乙酯萃取液和萃取硅藻土的乙酸乙酯,蒸出乙酸乙酯,得到产物(?)-(2S,3S)-3-(4-碘苯基)-3-羟基-2-甲基丙酸甲酯,反应转化率94-96%,产品收率92-94%,对映体过量率97-98%。
2.权利要求1所述的方法,其特征在于湿酵母细胞制备过程如下:产朊假丝酵母经斜面、摇瓶、种子罐培养得到种子液;发酵罐加入培养液,装料系数为0.6-0.7,121℃高压灭菌30分钟,冷却至27-28℃,将产朊假丝酵母种子液接种至发酵罐,接种比例为6-6.5%,通气比为1.7-1.8V/(V分钟),27-28℃培养21-23小时,用过滤式离心机离心得到湿酵母细胞,用作生物还原反应催化剂。
3.权利要求1所述的方法,其特征在培养液成份为:葡萄糖20-22 g/L,麦芽浸膏23-25 g/L,木糖6-7 g/L,(NH4)2SO4 4.8-5.3 g/L,KH2PO4 9-11 g/L,MgSO4.7H2O 0.3-0.4 g/L,CaCl2 0.35-0.4 g/L,硫酸铵0.2-0.25g/L,硫酸镁0.3-0.4g/L,pH6.2。
4.权利要求1所述的方法,其特征在于所述吸附了底物的硅藻土制作方法为,将底物溶于乙酸乙酯,底物与乙酸乙酯的比率为0.5:2,得到底物的乙酸乙酯溶液,用硅藻土吸收此溶液,然后,烘干、回收乙酸乙酯,即得到吸附底物的硅藻土,调节底物与硅藻土用量,使得底物与硅藻土的质量比率为0.37-0.4。
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