[发明专利]一种荧光负染法检测活细胞的方法有效
| 申请号： | 201410515671.1 | 申请日： | 2014-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN104345052B | 公开（公告）日： | 2017-10-20 |
| 发明（设计）人： | 何向锋;强福林;沈康;蔡晶;张一心;王建红;刘继斌 | 申请（专利权）人： | 南通市肿瘤医院 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;G01N1/30 |
| 代理公司： | 苏州创元专利商标事务所有限公司32103 | 代理人： | 范晴 |
| 地址： | 江苏省南通市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 荧光 负染法 检测 细胞 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种荧光负染法检测小鼠巨噬细胞RAW264.7摄取SPIO的方法，包括以下步骤：
(1)将不透光的超顺磁性氧化铁纳米粒子SPIO加入细胞悬液中，混合均匀，室温孵育进行标记；
(2)在标记细胞溶液中，加入活细胞荧光染色试剂CFSE荧光染料进行染色，然后用PBS溶液洗涤2-4次去上清，保留沉淀部分；
(3)将前述沉淀部分的标记染色细胞在荧光显微镜或激光扫描共聚焦显微镜及其配套的活细胞工作站下进行检测。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(1)中的室温孵育时间为6～24h。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述细胞为原代或传代培养细胞。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述的步骤(1)标记细胞后，用普鲁士蓝染色法对细胞标记情况进行检验。
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