[发明专利]一种棉花再生株移植法

说明书

技术领域

本发明涉及棉花技术领域，具体为一种棉花再生株移植法。

背景技术

棉花经农杆菌介导法转化外源基因获得的转基因再生株，经分子检测，证明外源基因已转入受体棉花中，转化的再生株移植法采用嫁接法或常规移栽法正常成活，然后生长为所需要的转基因棉花。

转基因棉花再生株常规移栽法：先转基因棉花再生株生根苗打开瓶盖置于培养间炼苗1-2天；再将转基因棉花洗去根部培养基，栽入装有灭菌的土壤或砂土的容器中，一次性浇透水；然后放入湿度70％、温度27℃～29℃培养箱中，先整株盖株培养8~10天，然后移去盖棉株的容器，再在培养箱培养5~7天左右；最后移入正常条件的温室中成活到棉花开花结果。

棉花转基因的目的是将外源目的基因转入常规棉花中，以期获得转基因棉花，从“九五”以来一直是国家“863”的重点研究项目。获得的转基因棉花植株价格昂贵，但是，由于现有转基因棉花再生株移植法，需要在高温，低湿的培养箱中培养，容易造成根部腐烂，造成活率低的问题，一般成活率只有20%～60%，而且在培养过程中需要先整株加盖，然后再移盖培养，操作步骤比较繁琐，所以一直以来达不到理想的结果。

寻找一种操作简单，成活率高的转基因棉花再生株移植法成为目前研究的热点。

发明内容

本发明是为了解决现有棉花再生株移植法采用高温、低湿的，而造成成活率低，步骤繁琐的问题，棉花再生株移植法。

本发明棉花再生株移植法包括以下步骤：

1）将转基因棉花再生株生根苗瓶盖打开进行室内瓶内炼苗2天～3天；

2）将转基因棉花再生株根部培养基洗去，栽入装有经灭菌土壤的容器中，一次性浇透水，在湿度为88％～90％、温度为20℃～22℃的培养箱中培养10~15天；

3）移入正常条件的温室中成活到棉花开花结果。

常规的移植方法是在高温低湿的环境下进行，先整株盖株培养8~10天，然后移去盖棉株的容器，再培养5~7天左右，这样在高温低湿的环境中再生株根部容易腐烂，引起整株死亡，而由于获得转基因再生株的价格昂贵，从而使得成本提高。本发明人经过大量实验，最终采用湿度为88％～90％、温度为20℃～22℃的低温、高湿培养环境，使得成活率达90%～95％，且在培养过程中省去用容器盖株的培养步骤。

用转基因棉花再生株每40株为一组，共9组，先将再生株生根苗瓶盖打开进行室内瓶内炼苗2天～3天，再将转基因棉花再生株根部培养基洗去，栽入装有经灭菌土壤的容器中，一次性浇透水，在湿度为88％～90％、温度为20℃～22℃的培养箱中培养10~15天，然后移入正常条件的温室中，观察成活率为90%～95％。具体实验数据如下表所述：

本发明转基因棉花再生株移植法，采用低温高湿的培养环境，极大的提高了成活率，且简化了现有转基因棉花再生株移植法中的整株用玻璃杯或者塑料膜加盖这一步骤，是一种较为理想的转基因棉花再生株移植法。

实施实施方式

实施例1

将转基因棉花再生株生根苗瓶盖打开进行室内瓶内炼苗2天；再将炼苗后的再生株根部培养基洗去，栽入装有灭菌土壤的容器中，一次性浇透水，在湿度为90％、温度为22℃的培养箱中培养15天；移入温室中培养成活到棉花开花结果。

实施例2

将转基因棉花再生株生根苗瓶盖打开进行室内瓶内炼苗3天；再将炼苗后的再生株根部培养基洗去，栽入装有灭菌土壤的容器中，一次性浇透水，在湿度为88％、温度为20℃的培养箱中培养10天；移入温室中培养成活到棉花开花结果。

实施例3

将转基因棉花再生株生根苗瓶盖打开进行室内瓶内炼苗3天；再将炼苗后的再生株根部培养基洗去，栽入装有灭菌砂土的容器中，一次性浇透水，在湿度为89％、温度为2021℃的培养箱中培养13天；移入温室中培养成活到棉花开花结果。