[发明专利]一种含有甲硫氨酸结构的罗丹明pH荧光探针及其应用

权利要求书

1.一种含有甲硫氨酸结构的罗丹明pH荧光探针，其特征在于，所述荧光探针为Rh-pH荧光探针，Rh-pH荧光探针的结构通式如(Ⅰ)所示:

其中，

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₄＝H，R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝-CH₃；

或R₁＝R₂＝-CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₄＝-(CH₂)₃-，R₂＝R₃＝-(CH₂)₃-。

2.如权利要求1所述的含有甲硫氨酸结构的罗丹明pH荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将罗丹明类化合物与三氯氧磷加入到1，2-二氯乙烷中，加热回流反应3-5小时，冷却至室温后，加入氨基酸类化合物的乙腈溶液和三乙胺，室温下搅拌24小时，反应液用二氯甲烷萃取，取下层液，干燥，经硅胶柱层析提纯，得到白色固体；将该白色固体溶于甲醇中，再加入氢氧化钠饱和水溶液，70-90℃加热水解，得到目标产物Rh-pH荧光探针。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述罗丹明类化合物为罗丹明B、罗丹明6G、四甲基罗丹明TMR、罗丹明110或罗丹明101，所述氨基酸类化合物为甲硫氨酸甲酯。

4.如权利要求2-3之一所述的方法，其特征在于，所述罗丹明类化合物与三氯氧磷与氨基酸类化合物与三乙胺的摩尔比为1:3-6:1：1。

5.如权利要求1所述的含有甲硫氨酸结构的罗丹明pH荧光探针在检测生理体系pH中的应用。

6.如权利要求5所述的应用，其特征在于，荧光探针在检测活细胞线粒体或线虫体内pH的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述活细胞为Hela细胞株、MCF-7细胞株或RAW264.7细胞株，所述的线虫体为秀丽隐杆线虫。